Legăturile disulfură sunt uneori numite legături SS sau punți disulfurice. Punțile disulfurice afectează bioactivitatea substanțelor biologice, cum ar fi peptidele, proteinele și anticorpii.
Yaohai Bio-Pharma oferă servicii de analiză a legăturilor disulfurice bazate în principal pe cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS).
Am fost implicați în caracterizarea structurală a proteinelor a diferitelor molecule mari, inclusiv vaccinuri subunități recombinante, nanocorpi/VHH/anticorpi cu un singur domeniu (sdAbs), fragmente de anticorpi, hormoni/peptide, citokine, factori de creștere (GF), enzime, colageni, etc.
Cerințe de reglementare pentru legăturile disulfurice
Există numere și formațiuni diferite de punți disulfură în diferite substanțe biologice, care ar trebui să fie evaluate pe deplin în timpul studiilor de caracterizare a proteinelor dacă secvența de aminoacizi primară așteptată a produsului conține aminoacid cisteină. Acest lucru este cerut și din documentul de reglementare ICH Topic Q6B.
Metode de analiză
| Analiză |
Aplicate |
| Legături disulfurice |
Cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LC-MS) după digestie |
Pentru datele necesare pentru evaluarea completă a punților disulfurice și a tiolilor liberi, oamenii de știință de la Yaohai Bio-pharma efectuează cartografierea peptidelor post-digestie cu o protează specifică. Apoi se analizează utilizând spectrometria de masă cu ionizare LC/Electrospray on-line (ES-MS) și/sau LC/ES-MS/MS înainte și după reducere.
Yaohai Bio-pharma poate efectua, de asemenea, testul Ellman, care este o parte importantă a oricărei evaluări a unui produs care conține complet cisteină. În cadrul testului Ellman, derivatizăm sulfhidrili folosind (acid 5,5’-ditio-bis-[2-nitrobenzoic]). Pentru a determina nivelurile de tioli liberi, produsul rezultat este analizat prin spectrofotometrie UV la 412 nm.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
