Toate categoriile
Preparare de Proteină Fără Etichetă

Preparare de Proteină Fără Etichetă

Tag-urile proteice, folosite ca parteneri de fuziune în tehnologiile de ADN recombinant, permit purificarea prin afinitate într-o singură etapă a diferitelor proteine/peptide cu caracteristici variate. În ciuda acestei importante avantaje, tag-urile, fiind aminoacizi exogeni, pot modifica structura și funcțiile biologice ale proteinelor. Prin urmare, proteinele sau peptidii fără tag sunt mai preferați pentru a se asigura că siguranța și eficacitatea sunt păstrate, în special în domeniul biofarmaceutic. O proteină recombinantă cu un tag de fuziune are posibilități limitate de a obține autorizația de la agențiile medicale/administrațiile de medicamente.

Pe baza platformei de cercetare și dezvoltare a biologicelelor microbiene, Yaohai Bio-Pharma oferă servicii personalizate de pregătire a proteinelor fără etichetă (Tag-free), dedicate îndeplinirea obiectivelor unice pentru cercetare, dezvoltare și producție în vederea utilizării clinice.

Cuvinte cheie: producție de proteine fără etichetă, purificare a proteinelor neetichetate, pregătire a proteinelor bazată pe etichetă liberă, expresie și purificare a proteinelor fără etichetă, proteină țintă altfel decât cu etichetă

Aplicație: cercetarea medicamentelor umane, dezvoltarea medicamentelor pentru animale, dezvoltarea vaccinurilor recombinate, producția biologicelor molecule mari recombinate

Platforma noastră Microbială de Cercetare și Dezvoltare

Avem experiență în ingineriașirea microbială, fermentarea și purificarea produselor.

Bacterii: Escherichia coli (E. coli)

Levură: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opțiuni Personalizate
Modalitate Proteină Recombinantă
Materiale de Start Secvențe gene, plasmid recombinant sau strainuri ingineriate
Rezultate prezentabile Purificare: >80%, >85%, >90% Cantitate: 0.2~10 g (a fi determinat de proiect)
Sistem de Expresie și Formare

E. coli secreție periplasmatică, expresie solubilă și corpuri de incluziune;

Expresie intracelulară sau prin secreție la levadură

Metode de Analiză Ultraviolett (UV), testul cu bicinconinica acidă (BCA), Bradford sau Lowry pentru cantitate
Electroforeză în gel de poliacrilamidă cu dodecilsulfat de sodiu (SDS-PAGE) pentru testarea purificării
Opțional: Western blot (WB), asigurarea prin legare enzymatică (ELISA), cromatografia lichidă cu performanță ridicată (HPLC)
Impurități reziduale Endotoxine (opțional)
Detalii ale Serviciului

Servicii

Detalii ale Serviciului

Timp minim (zi de lucru)

Sinteza genetică

Optimizare a codonilor pentru gazdă specifică de exprimare

7 ~ 10 zile

Sinteza genetică

Construcția plasmidei/vectoarelor

Clonarea în plasmid/vector

2 zile

Transformarea plasmidei

Verificare prin reacție în lanț a polimerazii (PCR), digestie cu enzyme de restricție, secvențare genetică

3 zile

Expresie proteică în E. coli

Transformare a plasmidei,

2 zile

Cultivare în flacon agitat

3 zile

fermentare la scară de 7L, optimizare

4 zile / lot

Purificare a proteinelor fără tag, optimizare

5~10 zile / lot

Testare prin electrofozeză pe gel de poliacrilamidă cu dodecilsulfat de sodiu (SDS-PAGE)

Expresie proteică în levură

Preparare a celulelor competente cu levură

4 zile

Linearizare plasmid și electro-transformare

fermentare la scară de 7L, optimizare

5 zile

Purificare a proteinelor fără tag, optimizare

7 zile / lot

Purificare proteină fără tag

5~10 zile / lot

QC prin SDS-PAGE

Servicii Adiționale (Opționale)
Obțineți un presupus gratuit

Get in touch