toate categoriile
Preparare de proteine ​​fără etichete

Preparare de proteine ​​fără etichete

Acasă >  CDMO microbian  >  Cercetare și descoperire  >  Preparare de proteine ​​fără etichete

Preparare de proteine ​​fără etichete

Etichetele de proteine, ca parteneri de fuziune utilizați în tehnologiile ADN recombinant, permit purificarea eficientă, într-o singură etapă, prin afinitate pentru diferite proteine/peptide cu diferite caracteristici. În ciuda acestui avantaj important, etichetele ca aminoacizi exogeni pot modifica structura proteinelor și funcțiile biologice. Prin urmare, proteinele sau peptidele nemarcate (fără etichete) sunt mai preferate pentru a asigura siguranța și eficacitatea, în special în domeniul biofarmaceutic. O proteină recombinată cu o etichetă de fuziune are posibilități limitate de obținere a autorizației de la agențiile medicale/de administrare a medicamentelor.

Bazat pe platforma de cercetare și dezvoltare în domeniul microbian biologic, Yaohai Bio-Pharma oferă servicii personalizate de preparare a proteinelor fără etichete (tag-free) dedicate îndeplinirii obiectivelor unice de cercetare, dezvoltare și producție pentru uz clinic.

Cuvinte cheie: producție de proteine ​​fără etichete, purificare de proteine ​​fără etichete, preparare de proteine ​​pe bază de etichete libere, exprimare și purificare a proteinelor fără etichete, proteină țintă extrem de fără etichete 

Aplicație: cercetare în medicina umană, dezvoltare în medicina animală, dezvoltare de vaccin recombinant, producție de substanțe biologice recombinate cu molecule mari

Platforma noastră de cercetare și dezvoltare microbiană

Avem experiență în ingineria tulpinilor microbiene, fermentație și purificarea produselor.

Bacterii: Escherichia coli (E. coli)

Drojdie: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opțiuni personalizate
Modalitatea Proteine ​​recombinante
Materiale de început Secvențe de gene, plasmidă recombinată sau tulpini modificate
livrabile Purificare: >80%, >85%, >90% Cantitate: 0.2~10 g (a fi determinat de proiect)
Sistem de expresie și formare

E. coli secreția periplasmatică, expresia corporală solubilă și de incluziune;

Drojdie intracelulară sau expresie secretie

Metode de analiză Ultraviolet (UV), analiza acidului bicinconinic (BCA), Bradford sau Lowry pentru cantitate
Electroforeză pe gel de poliacrilamidă cu dodecil-sulfat de sodiu (SDS-PAGE) pentru testarea purificării
Opțional: Western blot (WB), test imunosorbent legat de enzime (ELISA), cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC)
Impurități reziduale Endotoxină (opțional)
Detalii despre servicii

servicii

Detalii despre servicii

Cronologie minimă (zi lucrătoare)

Sinteza genelor

Optimizarea codonilor pentru o anumită gazdă de expresie

7 ~ 10 zile

Sinteza genelor

Construcție plasmidă/vector

Clonarea în plasmidă/vector

2 de zile

Transformarea plasmidei

Verificarea reacției în lanț a polimerazei (PCR), digestia cu enzime de restricție, secvențierea genelor

3 de zile

Exprimarea proteinelor în E. coli

Transformarea plasmidei,

2 de zile

Cultivare în balon de agitare

3 de zile

7L-sac fermentare, optimizare

4 zile/lot

Purificarea proteinelor fără etichete, optimizare

5 ~ 10 zile / lot

Testare prin electroforeză pe gel de poliacrilamidă cu dodecil-sulfat de sodiu (SDS-PAGE)

Expresia proteinelor în drojdie

Prepararea celulelor competente de drojdie

4 zile

Linearizarea plasmidelor și electro-transformarea

7L-sac fermentare, optimizare

5 zile

Purificarea proteinelor fără etichete, optimizare

7 zile/lot

Purificarea proteinelor fără etichete

5 ~ 10 zile / lot

QC prin SDS-PAGE

Servicii suplimentare (Opțional)
Obțineți o Consultație Gratuită

Contactați-ne