Semnificația screening-ului tulpinilor
Screeningul gazdelor adecvate este necesar pentru dezvoltarea CMC biologice, care determină calitatea și consistența produsului și a procesului de fabricație. Obiectivul direct al screening-ului gazdei este de a oferi o bancă de celule primare candidate (PCB), cu niveluri ridicate de expresie și stabilitate ridicată atât în ceea ce privește stabilitatea trecerii, cât și stabilitatea la stocare. Screeningul gazdei potrivite este necesar din două motive principale:
- În primul rând, pentru a selecta gazda microbiană cu un nivel ridicat de expresie. Există mai multe tulpini disponibile comercial, care sunt utilizate pentru a exprima diferite tipuri de proteine, cum ar fi proteine toxice, proteine solubile sau proteine eucariote.
- În al doilea rând, să screening gazda cu stabilitate genetică. Testarea stabilității genetice este un punct cheie pe tot parcursul ciclului de viață al producției. Se sugerează că stabilitatea genetică ridicată este recunoscută ca o altă caracteristică cheie pentru tulpina adecvată.
Cuvinte cheie: selecția tulpinilor microbiene, screening-ul tulpinilor microbiene, screening-ul cu randament ridicat al bacteriilor sau drojdiilor, screening-ul tulpinilor cu producție mare, screening-ul tulpinilor foarte stabile, screening-ul tulpinilor stabile genetice Aplicație: medicină umană, medicina animală, vaccin, biologie sintetică, moleculă mare recombinantă produse biologice, reactiv biologic
Servicii de screening ale tulpinilor Yaohai Bio-Pharma
Beneficiind de peste 10 ani de experiență CDMO în biologie microbiană, sprijinim dezvoltarea și fabricarea diferitelor molecule mari, inclusiv vaccinuri subunități recombinante, particule asemănătoare virusului (VLP), hormoni (insulina, GLP-1, hormon de creștere), citokine ( Interleukina-2/IL-2, IL-15, IL-21), factori de creștere (EGF, FGF, NGF), nanocorpi/anticorpi cu un singur domeniu (sdAbs), enzime etc.
Am acumulat experiență bogată în selecția diferitelor tipuri de vectori plasmidii și gazde microbiene, inclusiv bacterii Escherichia coli (E. coli), și drojdie Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Putem găsi cel mai bun sistem de exprimare pentru produsele dumneavoastră biologice unice.
Am colectat diverse gazde microbiene cu surse clare și CoA standard, inclusiv E coli expresie și expresie de drojdie.
Detalii despre servicii
|
servicii
|
Detalii despre servicii
|
Cronologie minimă/zi
|
livrabile
|
|
Construcția tulpinii (E. coli)
|
Transformarea plasmidei (multi-gazde)
|
5
|
COA al gazdelor comerciale Raport de construcție a tulpinilor
|
|
verificare PCR
|
|
Purificarea tulpinilor
|
|
Conservarea tulpinii
|
|
Construcția tulpinii (drojdie)
|
Prepararea celulelor de drojdie competente
|
10
|
|
Linearizarea plasmidelor
|
|
Transformare electro
|
|
Screeningul rezistenței/deficiențelor nutriționale
|
|
Purificarea tulpinilor
|
|
Conservarea tulpinii
|
|
Screening adecvat pentru gazdă
|
Extracția ADN-ului de plasmide sau genom
|
15-20
|
Procesul de screening al gazdei COA al tulpinilor proiectate
|
|
Verificare PCR, digestia cu enzime de restricție
|
|
Secvențierea genei țintă
|
|
Screeningul gazdelor cu expresie ridicată
|
|
Screeningul gazdelor cu stabilitate genetică
|
|
Conservarea tulpinii
|
Studiu de caz
O gazdă adecvată îmbunătățește nivelul de exprimare a proteinei de 2.5 ori.
Suntem însărcinați să dezvoltăm produse de mare producție E. coli încordare. Și am încercat trei tipuri de reclame E. coli gazde, pe baza caracteristicilor proteinei țintă. S-a arătat că tulpinile S1-1 și S1-2 (Fig A: Lane 1,2) au îmbunătățit nivelul de proteine de 3.5 ori decât tulpina inițială a clientului (Fig A: Lane 3).
În plus, tulpina S1-1 a avut o stabilitate genetică ridicată (Fig B) și a fost recunoscută ca tulpină candidată pentru banca de celule primare (PCB).
Caracteristicile serviciului nostru
Experiență demonstrată cu diverse gazde microbiene, de exemplu, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, tulpină PichiaPink 1/2/3/4; S.cerevisiae si H. polymorpha.
Avem experiență cu E. coli secreția periplasmatică, expresia solubilă și a corpului de incluziune, precum și expresia intracelulară sau de secreție de drojdie. Nu adăugăm antibiotice sau adăugăm antibioticele sub îndrumări de reglementare.
Stabilim o platformă de screening cu randament ridicat pentru a verifica tulpinile cu producție mare și stabile din peste o sută de tulpini candidate.
Este asigurat că procesul de inginerie și screening al tulpinilor este trasabil, în conformitate cu Managementul Bunului Date și Înregistrări.
RO
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
