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Caratterizzazione della struttura proteica

Caratterizzazione della struttura proteica

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Caratterizzazione strutturale delle proteine

Le proteine ​​sono costituite da catene di amminoacidi che interagiscono tra loro per formare una struttura quaternaria. La struttura delle proteine ​​può essere primaria, secondaria, terziaria o quaternaria ed è direttamente correlata alla loro funzione. Yaohai Bio-pharma offre servizi di caratterizzazione strutturale allineati a ICH Q6B per caratterizzare completamente la struttura primaria e di ordine superiore delle molecole proteiche.

Siamo stati coinvolti nella caratterizzazione strutturale proteica di varie molecole di grandi dimensioni, inclusi vaccini a subunità ricombinanti, anticorpi a dominio singolo (sdAbs)/VHH, frammenti di anticorpi, ormoni/peptidi, citochine, fattori di crescita (GF), enzimi, collageni, ecc. .

Caratterizzazione strutturale delle proteine

Caratterizzazione fisico-chimica

Sequenziamento degli aminoacidi primari

Struttura di ordine superiore

Modifica post-traduzionale (PTM)

Metodi di analisi
Analisi Metodi
Peso molecolare Cromatografia liquida-spettrometria di massa (LC-MS) / Cromatografia liquida/spettrometria di massa elettrospray (LC/ES-MS) di proteine ​​intatte, ridotte e N-deglicosilate
Analisi delle varianti dimensionali LC-MS, cromatografia ad esclusione dimensionale-spettrometria di massa (SEC-MS), diffusione dinamica della luce (DLS), ultracentrifugazione analitica (AUC), cromatografia ad esclusione dimensionale-diffusione della luce multi-angolo (SEC-MALS)
Analisi delle varianti di carica LC-MS, cromatografia a scambio ionico-spettrometria di massa (IEX-MS)
Stabilità termica (Tm) Calorimetro differenziale a scansione (DSC)
Coefficiente di estinzione Analizzatori di amminoacidi
Mappatura dei peptidi LC-MS dopo digestione con proteasi
Copertura della sequenza proteica LC-MS dopo una-tre digestione
Sequenziamento N-terminale LC-MS dopo la digestione, determinata mediante mappatura dei peptidi, degradazione di Edman
Sequenziamento del terminale C LC-MS dopo la digestione
Legami disolfuro LC-MS dopo la digestione
Gruppi solfidrilici liberi Il test di Ellman
Ossidazione degli amminoacidi LC-MS, cromatografia liquida ad alte prestazioni a fase inversa (RP-HPLC) o cromatografia di interazione idrofobica-cromatografia liquida ad alte prestazioni (HIC-HPLC) e spettrometria di massa (MS)
Isomerizzazione degli amminoacidi LC-MS dopo la scissione enzimatica
Deamidazione LC-MS dopo la scissione enzimatica
Modifica del terminale N LC-MS dopo la digestione
Modifica del terminale C LC-MS dopo la digestione
Ritaglio della lisina C-terminale LC-MS dopo la digestione
Profilazione degli N-glicani LC-MS dei glicani rilasciati
Sito di N-glicosilazione LC-MS dopo la scissione enzimatica
Occupazione del sito di N-glicosilazione LC-MS dopo digestione deglicosilasi e proteasi (tripsina o Asp-N).
Struttura di ordine superiore Dicroismo circolare (CD)Spettrometro a infrarossi (IR)
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