I principi attivi biologici sono molecole complesse e grandi, particolarmente sensibili ai fattori ambientali: temperatura, ossidazione, luce, contenuto ionico e taglio. È fondamentale condurre studi di stabilità sul principio attivo e sul prodotto farmaceutico nelle condizioni di stoccaggio previste, in condizioni accelerate e in condizioni di degradazione forzata. I dati di stabilità vengono generalmente utilizzati per supportare la durata della conservazione, la data di scadenza e le condizioni di stoccaggio.
In conformità con la guida ICH Q5C, Yaohai Bio-Pharma offre servizi di studio della stabilità per proteine, peptidi, plasmidi e mRNA, che includono studi di stabilità a lungo termine, studi di stabilità accelerata e studi di degradazione forzata. Inoltre, disponiamo di tutte le capacità necessarie per il deposito dei campioni e l'analisi degli Attributi di Qualità Critici (CQA) per raccogliere i dati di stabilità.
Requisiti normativi per gli studi di stabilità
Secondo la guida ICH Q5C, "Dati di stabilità adeguati devono essere sviluppati per i prodotti biotecnologici/biologici, poiché molte condizioni esterne possono influenzare l'attività, la purezza e la qualità del prodotto. Si consiglia inoltre fortemente di condurre studi sulla sostanza farmaceutica e sul prodotto finito sotto condizioni accelerate e di stress."
Studi di Stabilità in Tempo Reale (a lungo termine)
Nella stabilità a lungo termine in tempo reale, la sostanza farmaceutica o il prodotto finito viene conservato nelle condizioni di stoccaggio previste e monitorato fino a quando le caratteristiche biologiche cambiano al di là dei limiti accettabili. Come risultato degli studi di stabilità a lungo termine, può essere stabilito il periodo di conservazione, la data di scadenza, le condizioni di stoccaggio e gli intervalli di campionamento/test.
Tabella 1. La frequenza dei test negli studi di stabilità a lungo termine dei biologici pre-approvazione
| Durata di conservazione |
Intervalli di test |
Punti temporali |
| 1 anno o meno |
Mensilmente per i primi 3 mesi;
Ogni 3 mesi successivamente
|
A 0, 1, 2, 3, 6, 9 e 12 mesi |
| Più di 1 anno |
Ogni 3 mesi per il primo anno;
Ogni 6 mesi per il secondo anno;
Annualmente successivamente
|
A 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 mesi e annualmente successivamente |
Studi di stabilità accelerata
La temperatura di conservazione consigliata per i biofarmaci iniettabili è generalmente compresa tra 2 e 8℃. Gli studi di stabilità accelerata vengono condotti per periodi più brevi sotto condizioni accelerate, come ad esempio temperature elevate. I dati sulla stabilità sono riconosciuti come informazioni di supporto per la stabilità del prodotto e vengono ampiamente utilizzati nella determinazione della durata e della data di scadenza, nonché nello sviluppo delle formulazioni.
Tavola 2. Esempi di Studi di Stabilità Accelerata
| Studi di Stabilità |
Condizioni accelerate |
Punti di campionamento |
| Studi di stabilità accelerata |
temperatura elevata
umidità relativa
|
A 0, 1, 2, 3, 6 mesi |
Studi di Degradazione Forzata
Lo scopo degli studi di degradazione forzata è quello di raccogliere informazioni sulla stabilità in condizioni di stress, come temperature elevate, umidità, luce, ossidazione, congelamento-scongelamento o stress meccanico (agitazione, taglio). Gli studi di degradazione forzata della sostanza farmaceutica o del prodotto finito in condizioni estreme possono aiutare a riconoscere i fattori chiave/parametri che portano alla degradazione dei biologici. Questi dati sono utili per la valutazione della robustezza della formulazione e del processo di produzione.
Tabella 3. Esempi di Studi di Degradazione Forzata
| Stress |
Condizioni di stress |
Durata |
| Temperatura |
Temperatura elevata (ad es., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Giorni-mesi |
| Umidità |
Umidità relativa (0~100%) |
Giorni-mesi |
| Luce |
Un minimo di 1,2 milioni di lx h e 200 W h/m2 |
Più giorni |
| Congelamento-scongelamento |
congelamento–scongelamento (da -20℃, -80℃ a 15℃) |
1~5 cicli |
| Agitazione, mescolamento |
50~500 giri/min |
Ore-giorni |
Metodi Analitici per lo Studio della Stabilità
| Attributi di Qualità Critici (CQAs) |
Metodi Analitici |
| Contenuto totale di proteine |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Particelle visibili |
Ispezione visiva |
| Aggregazione, frammenti |
Distribuzione della luce dinamica Cromatografia su gel di dimensione (SEC) HPLC\/UPLC, Elettroforesi capillare CE (CGE, CZE, cIEF\/iCIEF), SDS-PAGE non riducente |
| Mappatura e sequenziamento dei peptidi |
LC-MS\/MS |
| Legami Disolfuro |
LC-MS\/MS |
| PTM (ossidazione, isomerizzazione, deamidazione, glicosilazione) |
LC-MS\/MS |
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