L'isomerizzazione degli amminoacidi è un'importante forma di modifica post-traduzionale (PTM) che sta beneficiando dello sviluppo del metodo in corso. L'isomerizzazione dell'aspartato è una delle modifiche più comuni e significative in termini di impatto sulle proprietà dei biofarmaci proteici. L'acido aspartico (Asp) può isomerizzare facilmente per formare acido isoaspartico (isoAsp). L'isomerizzazione di Asp in isoAsp avviene frequentemente in bioterapia.
Yaohai-BioPharma offre un servizio di test per l'isomerizzazione degli amminoacidi, che consente di rilevare e caratterizzare isoAsp mediante LC-MS.
Siamo stati coinvolti nella caratterizzazione strutturale proteica di varie molecole di grandi dimensioni, inclusi vaccini a subunità ricombinanti, nanocorpi/VHH/anticorpi a dominio singolo (sdAbs), frammenti di anticorpi, ormoni/peptidi, citochine, fattori di crescita (GF), enzimi, collageni, eccetera.
Requisiti normativi per l'isomerizzazione degli amminoacidi
Secondo le linee guida ICH Q6B, le forme isomerizzate possono essere rilevate e caratterizzate mediante cromatografia, elettroforesi e/o altri metodi analitici pertinenti.
Metodi analitici
| Analisi |
Metodi |
| Isomerizzazione degli amminoacidi |
Cromatografia liquida-spettrometria di massa (LC-MS) dopo scissione enzimatica |
Procedure analitiche
ad esempio, isomerizzazione aspartica
1. Scissione enzimatica del residuo di acido aspartico utilizzando l'endoproteinasi AspN
2. LC-MS e analisi dei dati per quantificare il rapporto isoAsp/Asp
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