Tutte le categorie
Preparazione di Proteine Senza Tag

Preparazione di Proteine Senza Tag

Pagina principale >  Microbial CDMO  >  Ricerca e Scoperta  >  Preparazione di Proteine Senza Tag

Preparazione di Proteine Senza Tag

I tag proteici, utilizzati come partner di fusione nelle tecnologie del DNA ricombinante, consentono una purificazione affinità efficace in un solo passaggio per varie proteine/peptide con caratteristiche diverse. Nonostante questo importante vantaggio, i tag come aminoacidi esogeni possono alterare la struttura delle proteine e le loro funzioni biologiche. Pertanto, le proteine o peptide senza tag sono preferiti per garantire sicurezza ed efficacia, specialmente nel campo dei bi farmaci. Una proteina ricombinante con un tag di fusione ha possibilità limitate di ottenere l'autorizzazione dagli enti medici/farmaceutici.

Basandosi sulla piattaforma R&S di biologici microbici, Yaohai Bio-Pharma offre servizi personalizzati di preparazione di proteine senza tag dedicati a soddisfare obiettivi unici per ricerca, sviluppo e produzione per l'uso clinico.

Parole chiave: produzione di proteine senza tag, purificazione di proteine non contrassegnate, preparazione di proteine basata su tag libero, espressione e purificazione di proteine senza tag, proteina target altamente libera da tag

Applicazione: ricerca in medicina umana, sviluppo di medicina veterinaria, sviluppo di vaccini ricombinanti, produzione di biologici ricombinanti a grande molecola

La nostra Piattaforma R&D Microbica

Abbiamo esperienza in ingegneria del ceppo microbico, fermentazione e purificazione del prodotto.

Batteri: Escherichia coli (E. coli)

Lievi: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorfa)

Opzioni personalizzate
Modalità Proteina Ricombinante
Materiali di Partenza Sequenze genomiche, plasmidi ricombinanti o ceppi ingegnerizzati
Consegne Purificare: >80%, >85%, >90% Quantità: 0.2~10 g (da determinare in base al progetto)
Sistema di espressione e formazione

E. coli secrezione periplasmatica, espressione solubile e corpo di inclusione;

Espressione intracellulare o secreta da lieviti

Metodi di Analisi Ultravioletto (UV), bicinchoninico (BCA), Bradford o Lowry per la quantità
Elettroforesi su gel di poliacrilamide con SDS (SDS-PAGE) per il test di purificazione
Opzionale: Blot occidentale (WB), ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC)
Impurità residue Endotossina (opzionale)
Dettagli del servizio

Servizi

Dettagli del servizio

Tempistica minima (giorno lavorativo)

Sintesi genica

Ottimizzazione dei codoni per l'ospite di espressione specifico

7~10 giorni

Sintesi genica

Costruzione del plasmide/vettore

Clonazione nel plasmide/vettore

2 giorni

Trasformazione del plasmide

Verifica con reazione a catena della polimerasi (PCR), digestione con enzimi di restrizione, sequenziamento del gene

3 giorni

Espressione di proteine in E. coli

Trasformazione plasmidica,

2 giorni

Coltivazione in flacone agitato

3 giorni

fermentazione su scala di 7L, ottimizzazione

4 giorni/batch

Purificazione di proteine senza tag, ottimizzazione

5~10 giorni/batch

Test con elettroforesi su gel di poliacrilamide con sdss (SDS-PAGE)

Espressione di proteine in lievito

Preparazione di cellule di lievito competenti

4 giorni

Linearizzazione del plasmide e elettrotrasformazione

fermentazione su scala di 7L, ottimizzazione

5 giorni

Purificazione di proteine senza tag, ottimizzazione

7 giorni/batch

Purificazione di proteine senza tag

5~10 giorni/batch

QC mediante SDS-PAGE

Servizi Aggiuntivi (Facoltativi)
Ottieni un preventivo gratuito

Get in touch