L'analisi dei siti di N-glicosilazione è fondamentale per comprendere le funzioni dei glicani. Yaohai Bio-Pharma utilizza la Cromatografia Liquida-Spettrometria di Massa (LC-MS) dopo il taglio enzimatico per i siti di N-glicosilazione.
Siamo stati coinvolti nella Caratterizzazione Strutturale delle Proteine di vari grandi molecole, tra cui Vaccini Ricombinanti a Sottounita', Nanocorpi/VHHs/Corpi Antigenici Singolo-dominio (sdAbs), Frammenti di Antibodi, Ormoni/Peptidi, Cytokine, Fattori di Crescita (GF), Enzimi, Collagene, ecc.
Requisiti Regolatori per il Sito di N-Glicosilazione
Secondo la guida ICH Q6B, “per i glicoproteine, si determina il contenuto di carboidrati (zuccheri neutri, zuccheri amminici e acidi sialiici). Inoltre, si analizzano la struttura delle catene di carboidrati, il profilo degli oligosaccaridi (antennario) e i siti di glicosilazione della catena polipeptidica nel modo più completo possibile.
Metodo Analitico
| Analisi |
Metodi |
| Sito di N-glicosilazione |
Cromatografia Liquida-Spettrometria di Massa (LC-MS) dopo cleavage enzimatico |
Procedure
1. Digestione enzimatica della proteina utilizzando trypsin o altre proteasi
2. Separare i frammenti glicopeptidici
3. Confermare il sito di N-glicosilazione tramite LC-MS
4. Analizzare i dati
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