Yaohai Bio-Pharma offre servizi di analisi e test del sequenziamento N-terminale basati su Cromatografia Liquida-Spettrometria di Massa (LC-MS) o sul metodo di degradazione di Edman, che permette di determinare gli aminoacidi nei rispettivi termini della proteina di interesse. Le modifiche N-terminali possono anche essere analizzate tramite LC-MS.
Siamo stati coinvolti nella Caratterizzazione Strutturale delle Proteine di vari grandi molecole, tra cui Vaccini Ricombinanti a Sottounita', Nanocorpi/VHHs/Corpi Antigenici Singolo-dominio (sdAbs), Frammenti di Antibodi, Ormoni/Peptidi, Cytokine, Fattori di Crescita (GF), Enzimi, Collagene, ecc.
Requisiti Regolatori per il Sequenziamento N Terminale
Secondo le linee guida ICH Q6B, è necessario confermare la sequenza della tua proteina ed esaminare i termini per eventuali variazioni che potrebbero esistere.
Metodi di Sequenziamento N Terminale
| Analisi |
Metodo |
| Sequenziamento N-terminale |
Degradazione di Edman, Cromatografia Liquida-Spettrometria di Massa (LC-MS) |
Procedure
LC-MS
1. Marcatura fluorescente terminale del peptido
2. Digestioni multiple
3. Analisi LC-MS / Spettrometria di Massa (MS)
Degradazione di Edman
1. Elettroforesi su gel di Solfato Diodecile di Sodio (SDS) della tua proteina target
2. Trasferimento del gel su membrane di Fluoruro di Polivinilidene (PVDF) e colorazione
3. Identificare e tagliare la banda della proteina target
4. Sequenziamento di Edman del terminale N
5. Analisi dei dati
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