Molekylvægtbestemmelse ved LC-MS
Den intakte molekylvægt har altid været anerkendt som en vigtig egenskab ved biologiske lægemidler. Intakt molekylvægtsanalyse bruges til at demonstrere protein/peptidprodukterne og verificere biologiske stoffer. Måling af molekylvægt er et krav i de regulatoriske retningslinjer.
Yaohai Bio-Pharma tilbyder analyse af intakt molekylvægt under native, reducerede, N-deglycosylerede forhold. Vi anvender væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) til at bestemme den intakte molekylvægt.
Regulatoriske krav til molekylvægt
Det anbefales i ICH Q6, at "molekylvægt (eller størrelse) bestemmes ved hjælp af størrelsesudelukkelseskromatografi, SDS-polyacrylamidgelelektroforese (under reducerende og ikke-reducerende betingelser), massespektrometri (MS) og andre passende teknikker".
Analytiske metoder
| Analyse |
Metoder |
| Molekylær vægt |
LC-MS/væskekromatografi/elektrospray massespektrometri (LC/ES-MS) af native, reducerede, N-deglycosylerede proteiner eller underenhed |
Analytiske procedurer
Intakt molekylvægt:
- Udførelse af LC-MS på den native prøve som modtaget.
- LC-MS Dataanalyse.
Reduceret molekylvægt:
- Behandling af proteinprøven med et egnet reduktionsmiddel;
- Udførelse af LC-MS på det reducerede protein;
- LC-MS Dataanalyse.
N-deglycosyleret molekylvægt:
- Fjernelse af N-glycanerne med et passende enzym;
- Udførelse af LC-MS på det N-deglycosylerede protein;
- LC-MS Dataanalyse.
Reduceret og N-deglycosyleret molekylvægt:
- Behandling af proteinprøven med et egnet reduktionsmiddel;
- Fjernelse af N-glycanerne med et passende enzym;
- Udførelse af LC-MS på reduceret og N-deglycosyleret protein;
- LC-MS Dataanalyse.
Proteinunderenhed Molekylvægt:
- Underenhedsspaltning
- Udførelse af LC-MS på proteinunderenhed
- LC-MS dataanalyse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
INGEN
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
