N-Glycosylation site analyse er afgørende for at forstå funktionerne af glycaner. Yaohai Bio-Pharma bruger væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) efter enzymatisk spaltning for N-glykosyleringssted.
Vi har været involveret i proteinstrukturkarakterisering af forskellige store molekyler, herunder rekombinante underenhedsvacciner, nanostoffer/VHH'er/ enkeltdomæne antistoffer (sdAbs), antistoffragmenter, hormoner/peptider, cytokiner, vækstfaktorer (GF), enzymer, kollagener, etc.
Regulatoriske krav til N-glycosyleringssted
Ifølge ICH Q6B guideline, "for glycoproteiner bestemmes kulhydratindholdet (neutrale sukkerarter, aminosukkere og sialinsyrer). Endvidere analyseres strukturen af kulhydratkæderne, oligosaccharidmønsteret (antennær profil) og polypeptidkædens glycosyleringssted(er) i bedst muligt omfang.
Analytisk metode
Analyse |
Metoder |
N-glycosyleringssted |
Væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) efter enzymatisk spaltning |
Procedurer
1. Enzymfordøjelse af proteinet ved hjælp af trypsin eller anden protease
2. Adskil fragment glycopeptider
3. Bekræft N-glycosyleringsstedet med LC-MS
4. Analyser data