Betydningen af strain screening
At skærme ud efter egne værtsceller er nødvendigt for CMC-udvikling af biologiske produkter, hvilket afgør kvaliteten og konsekvensen af produktet og produktionen. Den direkte målsætning med værtskærmning er at levere en kandidat til primær cellebank (PCB) med høj udtryksniveau og høj stabilitet både i forhold til passagesabilitet og lagerstabilitet. At skærme ud efter en passende vært er nødvendigt af to hovedårsager:
- For det første at vælge den mikrobielle vært med højt udtryksniveau. Der findes flere kommersielle streger, der bruges til at udtrykke forskellige typer af protein, såsom giftige protein, løselige protein eller eukaryotiske protein.
- For det andet at skærme ud efter en vært med genetisk stabilitet. Testning af genetisk stabilitet er et nøglepunkt igennem hele produktionslivscyklussen. Det anbefales, at høj genetisk stabilitet anses som en anden nøgletal for en passende streng.
Nøgleord: udvalg af mikrobielle stammer, skærmning af mikrobielle stammer, højgenomgangsskærmning af bakterier eller gær, udvalg af højproduktionsstammer, udvalg af meget stabile stammer, genetisk stabil stammeudvalg Anvendelse: menneskelig medicin, dyremedicin, vacciner, syntetisk biologi, rekombinante store molekyl-biologiske produkter, biologiske reaktanter
Stammeudvælgningstjenester fra Yaohai Bio-Pharma
Takket være mere end 10 års CDMO-erfaring inden for mikrobielle biologiske produkter understøtter vi udviklingen og produktionen af forskellige store molekyler, herunder rekombinante subenheds-vacciner, viruslignende partikler (VLP), hormoner (insulin, GLP-1, væksthormon), cytokiner (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), vækstfaktorer (EGF, FGF, NGF), nanokroppige/Single-domain antibodies (sdAbs), enzymmer osv.
Vi har opbygget omfattende erfaring i udvælgningen af forskellige typer plasmidvektorer og mikrobielle værtsorganismer, herunder bakterier Escherichia coli (E. coli), og gær Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Vi kan finde det bedste udtryksystem til dine unikke biologiske produkter.
Vi har samlet forskellige mikrobielle værtsorganismer med klare kilder og standard CoA, herunder E.Coli udtryk og gærudtryk.
Servicedetaljer
|
Tjenester
|
Servicedetaljer
|
Minimumsfrist/dag
|
Leverancer
|
|
Strainkonstruktion (E. coli)
|
Plasmidtransformation (flertyper værter)
|
5
|
COA for kommersielle værter Rapport om strainkonstruktion
|
|
PCR-verifikation
|
|
Strain renhed
|
|
Strain bevarelse
|
|
Strain-konstruktion (Gær)
|
Forberedelse af kompetente gærcelleer
|
10
|
|
Plasmidlinearisering
|
|
Elektrotransformation
|
|
Modstands-/ernæringsmangelskærmning
|
|
Strain renhed
|
|
Strain bevarelse
|
|
Egnelig værtskærmning
|
Plasmid- eller genom-DNA-udtræk
|
15-20
|
Værter af skærmeprocessen COA for konstruerede stammer
|
|
PCR-verifikation, restriktionsenzymfordeling
|
|
Sekvensering af stamme gen
|
|
Skærmning af værter med høj udtrykning
|
|
Skærmning af værter med genetisk stabilitet
|
|
Strain bevarelse
|
Case studie
En passende vært forbedrer proteinudtrykningen med 2,5 gange.
Vi er blevet pålagt at udvikle højproducenter E. coli stamme. Og vi prøvede tre typer kommersielle E. coli værter, baseret på egenskaberne ved målproteinet. Det vises, at stammen S1-1 og S1-2 (Fig A: Lane 1,2) forbedrede proteinmængden til 3,5 gange mere end kundens oprindelige stamme (Fig A: Lane 3).
Desuden viste stammen S1-1 en høj genetisk stabilitet (Fig B), og den blev anset for at være kandidatstamme til oprettelse af primære cellebanker (PCB).
Vores service funktioner
Dokumenteret ekspertise med forskellige mikrobielle værtsorganismer, f.eks. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink stamme 1/2/3/4; S. cerevisiae og H. polymorpha .
Vi har erfaring med E. coli periplasmisk sekretion, løselig og inklusionskroppekspression samt gær intracellulær eller sekretionsekspression. Vi tilføjer ingen antibiotika eller følger reguleringsvejledninger ved brug af antibiotika.
Vi opretter en højgennemstrømningsskærmingsplatform til at skærmme efter højproduktive og stabile stammer blandt over et hundred kandidatstammer.
Det sikres, at processen for strejfingeniørarbejde og skærmning er sporbar under den Gode Data- og Registreringsforvaltning.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
