Bestemmelse af Molekylvekt ved LC-MS
Den intakte molekylvekt har altid været anset for at være en vigtig karakteristik for biologiske stoffer. Analyse af intakt molekylvekt bruges til at demonstrere protein/peptidprodukter og verificere biologiske stoffer. Måling af molekylvekt er en krav i de reguleringsmæssige retningslinjer.
Yaohai Bio-Pharma tilbyder analyse af intakt molekylvekt under nativ, reduceret og N-deglykosyerede forhold. Vi anvender Væskechromatografi-Massespektrometri (LC-MS) til at bestemme den intakte molekylvekt.
Reguleringskrav for Molekylvekt
Det anbefales i ICH Q6, at „molekylvejten (eller størrelsen) bestemmes ved hjælp af størrelseseksklusionskromatografi, SDS-polyacrylamidgelelektroforese (under reducerende og ikke-reducerende forhold), massespektrometri (MS) og andre passende teknikker“.
Analytiske metoder
| Analyse |
Metoder |
| Molekylvægt |
LC-MS / Væskedannelse/Elektrospray Massespektrometri (LC/ES-MS) af nativ, reduceret, N-deglykosyeret protein eller subenhed |
Analytiske Procedurer
Hel molekylevægt:
- Udførelse af LC-MS på det oprindelige naturlige prøveeksemplar.
- LC-MS dataanalyse.
Reduceret molekylevægt:
- Behandling af proteinsamplet med et passende reducerende agent;
- Udførelse af LC-MS på det reducerede protein;
- LC-MS dataanalyse.
N-deglykosyeret molekylevægt:
- Fjerne N-glykaner med et passende enzym;
- Udførelse af LC-MS på N-deglykosyleret protein;
- LC-MS dataanalyse.
Reduceret og N-deglykosyleret molekylvægt:
- Behandling af proteinsamplet med et passende reducerende agent;
- Fjerne N-glykaner med et passende enzym;
- Udførelse af LC-MS på reduceret og N-deglykosyleret protein;
- LC-MS dataanalyse.
Molekylvægt af proteinkedel:
- Kedeldeling
- Udførelse af LC-MS på proteinkedel
- Analyse af LC-MS-data
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
