Všechny kategorie
ENEN
Služby přípravy proteinů bez značek

Služby přípravy proteinů bez značek

Domů >  Služby přípravy proteinů bez značek

Služby přípravy proteinů bez značek

Proteinové značky jako fúzní partneři používané v technologiích rekombinantní DNA umožňují účinnou jednokrokovou afinitní purifikaci pro různé proteiny/peptidy s různými charakteristikami. Navzdory této důležité výhodě mohou značky jako exogenní aminokyseliny změnit strukturu proteinu a biologické funkce. Proto jsou pro zajištění bezpečnosti a účinnosti, zejména v biofarmaceutické oblasti, výhodnější neznačené (bez tagu) proteiny nebo peptidy. Rekombinantní protein s fúzní značkou má omezené možnosti pro získání povolení od lékařských/lékařských agentur.

Společnost Yaohai Bio-Pharma, založená na platformě výzkumu a vývoje mikrobiálních biologických látek, nabízí přizpůsobené služby přípravy proteinů bez značek (bez značek) věnované splnění jedinečných cílů výzkumu, vývoje a výroby pro klinické použití.

Klíčová slova: produkce proteinu bez tagů, purifikace neznačeného proteinu, příprava proteinu na bázi volného tagu, exprese a purifikace proteinu bez tagu, cílový protein vysoce bez tagů Aplikace: výzkum humánní medicíny, vývoj medicíny zvířat, vývoj rekombinantní vakcíny, rekombinantní velká molekula produkce biologických látek


Naše platforma pro mikrobiální výzkum a vývoj

Máme zkušenosti s inženýrstvím mikrobiálních kmenů, fermentací a čištěním produktů.

Bakterie: Escherichia coli (E. coli)

Kvasinky: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Přizpůsobené možnosti

Metoda Rekombinantní protein
Výchozí materiály Genové sekvence, rekombinantní plazmid nebo geneticky upravené kmeny
Dodávky Purifikace: >80 %, >85 %, >90 % Množství: 0.2~10 g (určeno projektem)
Výrazový systém a tvorba periplazmatická sekrece E. coli, exprese rozpustných a inkluzních tělísek; Kvasinková intracelulární nebo sekreční exprese
Analytické metody Ultrafialové (UV), stanovení kyseliny bicinchoninové (BCA), Bradford nebo Lowry pro množství Elektroforéza na polyakrylamidovém gelu s dodecylsulfátem sodným (SDS-PAGE) pro testování purifikace Volitelně: Western blot (WB), enzymová imunoanalýza (ELISA), vysoká účinnost kapalinová chromatografie (HPLC)
Zbytkové nečistoty Endotoxin (volitelné)

Podrobnosti o službách

Služby Podrobnosti služby Minimální časová osa (pracovní den)
Genová syntéza Optimalizace kodonů pro specifického expresního hostitele 7 ~ 10 dny
Genová syntéza
Konstrukce plazmidu/vektoru Klonování do plazmidu/vektoru 2 dny
Transformace plazmidu
Verifikace polymerázové řetězové reakce (PCR), štěpení restrikčními enzymy, sekvenování genů 3 dny
Exprese proteinu v E. coli Transformace plazmidu, 2 dny
Kultivace v třepané baňce 3 dny
7L-vaková fermentace, optimalizace 4 dny/várka
Čištění proteinů bez značek, optimalizace 5~10 dní/várka
Testování elektroforézou na polyakrylamidovém gelu s dodecylsulfátem sodným (SDS-PAGE)
Exprese bílkovin v kvasinkách Příprava kvasinkových kompetentních buněk 4 dní
Linearizace a elektrotransformace plazmidu
7L-vaková fermentace, optimalizace 5 dní
Čištění proteinů bez značek, optimalizace 7 dní / šarže
Čištění proteinů bez tagů 5~10 dní/várka
QC pomocí SDS-PAGE

Doplňkové služby (volitelné)

Vývoj fermentačního procesu

Vývoj procesu čištění proteinů bez značek

Pilotní škálování a výroba GMP

Analýza a testování

Naše funkce

Pracovali jsme na více než 300 upravených mikrobiálních kmenech, včetně E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaPink kmen1/2/3/4; a H. polymorpha.

Máme zkušenosti s periplazmatickou sekrecí E. coli, expresí solubilních a inkluzních tělísek, stejně jako s kvasinkovou intracelulární nebo sekreční expresí.

Vytváříme vysoce výkonnou screeningovou platformu pro screening vysoce produkujících a stabilních kmenů z více než stovky kandidátských kmenů.

Získejte zdarma nabídku

Ozvěte se nám