Vlastní syntéza saRNA
Samoamplifikující mRNA (saRNA), také známá jako replikonová RNA, kóduje sekvence mRNA in vitro transkripce (IVT) a geny virové replikázy odvozené z alfaviru nebo flavivirů. Geny virové replikázy umožňují samoamplifikaci mRNA, což vede ke zvýšené expresi proteinu a minimální požadované dávce RNA ve srovnání s neamplifikujícími mRNA. Dalším aspektem je, že saRNA je relativně velká molekula (více než 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma vytvořila sadu technologií syntézy mRNA, které poskytují neamplifikující mRNA a samoamplifikující mRNA (1000 nt~14000 nt), jako je sekvenční návrh a optimalizace, IVT, purifikace, lyofilizace a zapouzdření lipidových nanočástic (LNP). . Všechny produkty podléhají přísným standardům kontroly kvality.
Fig.1 Structural Features of IVT mRNAs: Conventional, Circular and Self-amplifying mRNA.
Sequence Features of Self-amplifying mRNA
The self-amplifying RNA comprises four non-structural proteins (designated as nsP1, nsP2, nsP3, and nsP4), which are derived from alphaviruses, Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV). Among these, nsP1 exhibits dual enzymatic activities, namely GTase and N7MTase, whereas nsP2 possesses RTPase activity, pivotal for capping the IVT mRNA to generate Cap 0 structure. Additionally, nsP2 serves as a protease and helicase, facilitating the intricate processing of the entire nsP complex. The precise function of nsP3 remains elusive, yet it engages in interactions with diverse host cell proteins, thereby contributing to the attenuation of the antiviral response mounted by the host.
An alphavirus subgenomic promoter (SGP) region is located before the gene of interest (GOI). The SGP element facilitates the initiation of GOI transcription by bypassing the reading of the sequence encoding viral nsP proteins.
Fig.2 Synthesis and cell assays of eGFP saRNA of Yaohai Bio-Pharma RNASci Platform.
Custom Solutions of saRNA
Protokol syntézy saRNA je podobný mRNA: Vlastní syntéza mRNA
- Sekvenční design
- Příprava plazmidové šablony
- in vitro transkripce (IVT)
- mRNA Enzymatic Capping
- Ko-transkripční čepička mRNA
- Purifikace mRNA
- Lyofilizace mRNA
- Zapouzdření LNP
- Analýza a testování
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
