Podle centrálního dogmatu je messenger RNA (mRNA) mostem pro přenos genetického materiálu z DNA do proteinů.
mRNA hraje biologickou roli tím, že kóduje proteiny in vivo, a zralá mRNA v eukaryotických organismech se skládá z pěti složek: 5' Cap (struktura čepičky), 5' UTR (nekódující oblast), ORF (otevřený čtecí rámec), 3ʹ UTR a 3' polyA konec (polyadenylátový konec).
Proces | Volitelná služba | Podrobnosti služby | Dodací lhůta (den) |
Návrh a optimalizace sekvence mRNA | Návrh a optimalizace kódovacích sekvencí |
Zarovnání sekvencí CDS Optimalizace kodonů CDS |
1 |
Návrh a optimalizace nekódujících sekvencí |
Návrh a optimalizace 5' UTR sekvence Návrh a optimalizace 3' UTR sekvence návrh a optimalizace polyA sekvence |
1-2 |
5' UTR/3' UTR |
|
3' PolyA ocas |
|
Komponenty mRNA | Biologické funkce | Optimalizační strategie |
5' uzávěr | Chraňte mRNA před degradací exonukleázami a jednejte ve shodě s polyA ocasem na 3' konci, proteinem vázajícím polyA a proteinem faktoru iniciace translace k zahájení translace proteinu. | The natural Cap1 structure avoids pattern recognition receptors and thus reduces the natural immune response, which can be achieved by one-step co-transcriptional capping or two-step enzymatic capping [see mRNA enzymatic capping and co-transcriptional capping for details]. |
5' UTR | 5' UTR může být rozpoznáno ribozomy, reguluje translaci mRNA a ovlivňuje stabilitu mRNA. | Obsahují Kozakovy sekvence bez velmi stabilní sekundární struktury. Přirozené UTR vysoce exprimovaných genů jsou výhodné pro in vitro transkripční (IVT) mRNA, jako je a-globin a p-globin. |
CDS | Oblasti kódující protein a kódující sekvence pro antigeny, protilátky nebo jiné funkční proteiny. | Optimalizace kodonů zvyšuje úroveň translace a poznamenává, že určité neoptimální kodony mohou hrát roli při skládání proteinů. |
3' UTR | Regulujte translaci a stabilitu mRNA. | Přirozené UTR vysoce exprimovaných genů jsou preferovány pro IVT mRNA, jako je α-globin a β-globin. |
3' polyA ocas | Regulate protein expression and protect cap structure from degradation. | Je vyžadována přiměřená délka (100-150 bp); kódující polyA konec na plazmidu transkripčního templátu zajišťuje definovanější délku polyA konce. |
Více zdrojů vysoce exprimovaných přirozených a modifikovaných UTR knihoven; zralá strategie modifikace UTR;
Spolupracujte s profesionálním týmem pro algoritmy AI na dokončení optimalizace kodonů.
Přidejte polyA sekvence podle templátů DNA pro přesnější kontrolu délky mRNA.
Dosáhněte účinné exprese mRNA s nízkou imunogenicitou.
Sekvenční návrh mRNA s dvěma reportéry: mRNA mCherry-eGFP
Služba mRNA společnosti Yaohai Bio-Pharma je nadále modernizována návrhem a optimalizací tandemové sekvence dvojitého reportérového genu, která umožňuje koexpresi duálních genů.
Pomocí konvenčního transfekčního činidla je dvojitá genová tandemová sekvence mCherry-eGFP mRNA transfekována do 293T buněk a jsou detekovány dva fluorescenční signály mCherry (červená) a zesílený zelený fluorescenční protein (eGFP) se současnou expresí po 48 hodinách a naskládány graf je zvýrazněn žlutě.
Exprese mRNA mCherry-eGFP v buňce 293T