mRNA je široce používána při studiu funkcí genů nebo proteinů. Mezitím je to běžné ve vývoji profylaktických a terapeutických biologických látek. Jako běžná strategie syntézy pro molekuly RNA nám in vitro transkripce (IVT) umožňuje efektivně získat přizpůsobené transkripty.
Společnost Yaohai Bio-Pharma vytvořila sadu technologií syntézy mRNA, které poskytují vysoce kvalitní RNA, jako je sekvenční návrh a optimalizace, IVT, purifikace, lyofilizace a zapouzdření lipidových nanočástic (LNP). Všechny produkty podléhají přísným standardům kontroly kvality (QC).
S vypuknutím pandemie COVID-19 v roce 2020 pokročila technologie mRNA mílovými kroky a související výzkum a aplikace dosáhly nebývalého rozvoje, včetně profylaktických vakcín pro prevenci infekčních chorob, terapeutických onkologických vakcín a léků, nádorové terapie, proteinů. substituční terapie, regenerativní medicína a buněčná a genová terapie (CGT).
mRNA vakcína | mRNA Therapeutics |
|
Proces | Volitelná služba | Podrobnosti služby | Dodací lhůta (pracovní den) | Dodávka |
Návrh a optimalizace sekvence mRNA | Návrh a optimalizace kódovacích sekvencí | Návrh sekvence CDS a optimalizace kodonů | 1-3 | Sekvenční soubor |
Návrh a optimalizace nekódujících sekvencí | Návrh a optimalizace UTR, polyA sekvencí | |||
Příprava plazmidové šablony pro transkripci | Příprava rekombinantního plasmidu | Genová syntéza | 7-10 | |
Amplifikace a extrakce plazmidu | 4 | |||
Linearizace a čištění plazmidu | ||||
mRNA in vitro transkripce | Ko-transkripční omezení (jednokroková metoda) | In vitro transkripce (IVT) / Cap analog | 1-2 | N / A |
Nukleotidové modifikace (UTP/CTP modifikace) | ||||
Odstranění templátu DNA (DNáza I) | ||||
Enzymatické zavíčkování (dvoustupňový proces) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotidové modifikace (UTP/CTP modifikace) | ||||
Odstranění templátu DNA (DNáza I) | ||||
Purifikace mRNA (chlorid lithný/magnetické kuličky) | ||||
Enzymatický uzávěr | ||||
Purifikace mRNA | Konvenční schéma čištění | Srážení chloridu lithného | 1 | mRNA léčivá látka |
Čištění magnetickými kuličkami | ||||
Schéma čištění chromatografické kolony | Kombinace více chromatografických metod | 1-2 | ||
Výměna vyrovnávací paměti | Ultrafiltrace | 1 | ||
Lyofilizace mRNA | Lyofilizace | Předmražení | 2-3 | mRNA lyofilizovaný prášek |
Primární sušení (sublimace) | ||||
Sekundární sušení (desorpce) | ||||
mRNAEncapsulation | LNP zapouzdření | LNP zapouzdření | 2-3 | mRNA-LNPDlékový produkt |
Koncentrace a výměna pufru | ||||
Analýza kvality mRNA | mRNA léčivá látka/lyofilizovaný prášek | Koncentrace, čistota | 1 | Zkušební protokol |
Integrita, efektivita zakrytí, distribuce polyA ocasu | 2-5 | |||
mRNA-LNP léčivý produkt | Účinnost zapouzdření | 1 | ||
Velikost a distribuce částic | ||||
Povrchový náboj | ||||
Validace exprese mRNA | Hodnocení 293T buněk | Pokovování buněk | 4 | |
Přechodná transfekce buněk | ||||
Pozorování fluorescenčního signálu | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) |
5' uzávěr | ▪ Bez čepice ▪ Cap0, co-capated ▪ Cap1, co-capated ▪ Cap1, enzymatické uzavření |
5' UTR/3' UTR | ▪ Přirozená sekvence UTR ▪ Mutantní/upravená sekvence UTR |
3' PolyA ocas | ▪ 100A ~120A ocas (doporučeno) ▪ Segmentovaný polyA ocas ▪ Jiné vlastní koncovky |
Modifikované nukleosidy | ▪ Neupravené báze ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-methylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosin (m5C) ▪ 5-methyluridin (m5U) ▪ 5-methoxyuridin (5moU) ▪ 2-thiouridin (s2U) ▪ 2'-O-methyl-U ▪ Další úpravy |
Integrovaný tok služeb
Poskytujte řadu služeb od návrhu front-end sekvence až po přípravu mRNA na konci, kontrolu kvality a validaci exprese.
Mezinárodní návrh a optimalizace nejmodernějších sekvencí
Profesionální návrh a optimalizace sekvence mRNA usnadňují efektivní expresi mRNA.
Diverzifikované modifikace nukleotidů
Účinně zvyšujte expresi mRNA a snižujte nepříznivé imunitní reakce mRNA.
Zralá purifikační platforma
Kombinací konvenční a samostatně navržené purifikační metody se získají vzorky mRNA s vysokou čistotou
Kompletní platforma kontroly kvality
Obohaťte možnosti kontroly kvality tak, aby splňovaly požadavky rutinních testů, jako je koncentrace, čistota a integrita A260/280, stejně jako požadavky na vysokou kvalitu kontroly, jako je účinnost uzávěru / distribuce polyA.
Rychlé doručení
Přizpůsobená mRNA může být dodána již za 7 dní s výjimkou externí syntézy sekvence.