Yaohai Bio-Pharma nabízí N-terminální sekvenční testování a služby analýzy dat založené na kapalinové chromatografii-hmotnostní spektrometrii (LC-MS) nebo Edmanově degradační metodě, která umožňuje určit aminokyseliny na příslušných koncích zájmového proteinu. N-koncová modifikace může být také analyzována pomocí LC-MS.
Podíleli jsme se na proteinové strukturní charakterizaci různých velkých molekul, včetně rekombinantních podjednotkových vakcín, nanoprotilátek/VHH/jednodoménových protilátek (sdAbs), fragmentů protilátek, hormonů/peptidů, cytokinů, růstových faktorů (GF), enzymů, kolagenů, atd.
Regulační požadavky pro N terminálové sekvenování
Podle pokynů ICH Q6B je nutné potvrdit sekvenci vašeho proteinu a prozkoumat konce na případné odchylky.
N Metody sekvenování terminálu
Analýza |
Metoda |
N-koncové sekvenování |
Edmanova degradace, kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (LC-MS) |
postupy
LC-MS
1. Proteinové N-terminální fluorescenční značení
2. Vícenásobné trávení
3. Analýza LC-MS/hmotnostní spektrometrie (MS).
Edmanova degradace
1. Gelová elektroforéza s dodecylsulfátem sodným (SDS) vašeho cílového proteinu
2. Přeneste gel na membrány z polyvinylidenfluoridu (PVDF) a obarvěte
3. Identifikujte a ořízněte pás cílového proteinu
4. Edmanovo sekvenování N-konce
5. Analýza dat