Stanovení molekulové hmotnosti pomocí LC-MS
Neporušená molekulová hmotnost byla vždy uznávána jako důležitá vlastnost biologických látek. Analýza neporušené molekulové hmotnosti se používá k prokázání proteinových/peptidových produktů a ověření biologických látek. Měření molekulové hmotnosti je požadavkem regulačních směrnic.
Yaohai Bio-Pharma nabízí analýzu neporušené molekulové hmotnosti za přirozených, redukovaných, N-deglykosylovaných podmínek. Pro stanovení neporušené molekulové hmotnosti používáme kapalinovou chromatografii-hmotnostní spektrometrii (LC-MS).
Regulační požadavky na molekulovou hmotnost
V ICH Q6 se doporučuje, aby „molekulární hmotnost (nebo velikost) byla stanovena pomocí vylučovací chromatografie, elektroforézy na SDS-polyakrylamidovém gelu (za redukčních a neredukujících podmínek), hmotnostní spektrometrie (MS) a dalších vhodných technik“.
Analytické metody
| Analýza |
Metody |
| Molekulární váha |
LC-MS / kapalinová chromatografie/elektrosprejová hmotnostní spektrometrie (LC/ES-MS) nativních, redukovaných, N-deglykosylovaných proteinů nebo podjednotek |
Analytické postupy
Intaktní molekulová hmotnost:
- Provedení LC-MS na nativním vzorku tak, jak byl přijat.
- LC-MS Analýza dat.
Snížená molekulová hmotnost:
- Ošetření vzorku proteinu vhodným redukčním činidlem;
- Provedení LC-MS na redukovaném proteinu;
- LC-MS Analýza dat.
N-deglykosylovaná molekulová hmotnost:
- Odstranění N-glykanů vhodným enzymem;
- Provedení LC-MS na N-deglykosylovaném proteinu;
- LC-MS Analýza dat.
Snížená a N-deglykosylovaná molekulová hmotnost:
- Ošetření vzorku proteinu vhodným redukčním činidlem;
- Odstranění N-glykanů vhodným enzymem;
- Provedení LC-MS na redukovaném a N-deglykosylovaném proteinu;
- LC-MS Analýza dat.
Molekulová hmotnost proteinové podjednotky:
- Štěpení podjednotky
- Provádění LC-MS na proteinové podjednotce
- Analýza dat LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
