Význam deformačního inženýrství
Kmenové inženýrství si klade za cíl vytvořit výraz hostitele s charakteristikami očekávání, což je nezbytné pro vývoj biologických CMC a určuje kvalitu a konzistenci produktu a výrobního procesu.
Klíčová slova: kmenové genetické inženýrství a screening, proteinová expresní konstrukce kmenů, mikrobiální buněčné inženýrství, bakteriální kmenové inženýrství, kvasinkové kmenové inženýrství, konstrukce prokaryotických mikroorganismů, inženýrství eukaryotických mikroorganismů, geneticky upravený kmen
Použití: humánní medicína, medicína zvířat, vakcína, syntetická biologie, rekombinantní biologika s velkou molekulou, biologické činidlo
Služby kmenového inženýrství Yaohai Bio-Pharma
S využitím více než 10 let zkušeností CDMO v mikrobiální biologii jsme nashromáždili bohaté zkušenosti s konstrukcí a výběrem různých typů plazmidových vektorů a mikrobiálních hostitelů (bakterie, kvasinky). Můžeme najít nejlepší expresní systém pro vaše jedinečné biologické látky.
Shromáždili jsme různé mikrobiální hostitele s jasnými zdroji a standardním CoA, včetně
Bakterie: Escherichia coli (E. coli)
Droždí: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Podrobnosti služby
Služby
|
Podrobnosti služby
|
Minimální časová osa/den
|
Dodávky
|
Kmenové inženýrství
|
Gene knock-out, neboli vymazání genu
|
TBD
|
Kmenově inženýrská zpráva
|
Gene knock-in neboli vložení genu
|
Konstrukce kmene (E. coli)
|
Transformace plazmidu (multi-hostitelé)
|
5
|
COA komerčních hostitelů,
Zpráva o stavbě kmene
|
PCR ověření
|
Čištění kmene
|
Konzervace kmene
|
Konstrukce kmene (kvasinky)
|
Příprava kompetentních kvasinkových buněk
|
10
|
Linearizace plazmidu
|
Elektro transformace
|
Screening rezistence/nutričního nedostatku
|
Čištění kmene
|
Konzervace kmene
|
Vhodný screening hostitele
|
Extrakce plasmidové nebo genomové DNA
|
15-20
|
Proces screeningu hostitele,
Zpráva o testování umělých kmenů
|
PCR verifikace, štěpení restrikčními enzymy
|
Sekvenování cílových genů
|
Screening hostitelů s vysokou expresí
|
Screening hostitelů s genetickou stabilitou
|
Konzervace kmene
|
Případová studie
Upravený Hansenula polymorpha zlepšil výtěžek exprese HPV L1 VLP.
Založili jsme kvásek Hansenula polymorpha (H. polymorpha) inženýrská a screeningová platforma pro expresi rekombinantních proteinů/peptidů. Nejprve jsme vygenerovali H. polymorpha kmeny s deficitem proteázy cílenou genovou delecí. Za druhé, vektor nesoucí gen HPV LI byl transformován na kompetentní H. polymorpha buňka. Nakonec testujeme nejlepší klon ze stovek možností s genetickou stabilitou a vysoce produkčními vlastnostmi.
Naše servisní funkce
Prokázali jsme odborné znalosti u různých mikrobiálních hostitelů, např. Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink kmen 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) a Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Máme zkušenosti s E. coli periplazmatická sekrece, exprese rozpustných a inkluzních tělísek, stejně jako kvasinková intracelulární nebo sekreční exprese.
Nepřidáváme žádná antibiotika nebo je přidáváme podle regulačních pokynů.
Zavádíme vysoce výkonnou screeningovou platformu pro screening vysoce produkujících a stabilních kmenů z více než stovky kandidátských kmenů.
Dbáme na to, aby byl proces kmenového inženýrství a screeningu sledovatelný v rámci Good Data and Record Management.