Analýza N-glykosylačního místa je zásadní pro pochopení funkcí glykanů. Yaohai Bio-Pharma používá kapalinovou chromatografii-hmotnostní spektrometrii (LC-MS) po enzymatickém štěpení pro místo N-glykosylace.
Podíleli jsme se na proteinové strukturní charakterizaci různých velkých molekul, včetně rekombinantních podjednotkových vakcín, nanoprotilátek/VHH/jednodoménových protilátek (sdAbs), fragmentů protilátek, hormonů/peptidů, cytokinů, růstových faktorů (GF), enzymů, kolagenů, atd.
Regulační požadavky na místo N-glykosylace
Podle směrnice ICH Q6B se „u glykoproteinů stanovuje obsah sacharidů (neutrální cukry, aminocukry a kyseliny sialové). Kromě toho jsou v nejlepším možném rozsahu analyzovány struktura sacharidových řetězců, oligosacharidový vzor (antenární profil) a glykosylační místo (místa) polypeptidového řetězce.
Analytická metoda
Analýza |
Metody |
N-glykosylační místo |
Kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (LC-MS) po enzymatickém štěpení |
postupy
1. Enzymové štěpení proteinu pomocí trypsinu nebo jiné proteázy
2. Oddělte fragmenty glykopeptidů
3. Potvrďte místo N-glykosylace pomocí LC-MS
4. Analyzujte data