Všechny kategorie
ENEN
Vývoj procesu mRNA

Vývoj procesu mRNA

Domů >  IVT RNA  >  mRNA CDMO  >  Vývoj procesu mRNA

IVT RNA

Vývoj procesu mRNA

Význam vývoje procesu mRNA
  • Cirkulární plazmidová DNA (pDNA)jako výchozí materiál by měl být zcela linearizován, aby se vytvořil transkript RNA definované délky.
  • Jako běžná strategie syntézy pro molekuly RNA, in vitro transkripce (IVT) nám umožňuje efektivně získávat přizpůsobené přepisy. IVT je komplexní reakce vyžadující směs templátu DNA, RNA polymerázy, inhibitoru RNázy, anorganické pyrofosfatázy, kofaktorů, nemodifikovaných nebo modifikovaných nukleosidtrifosfátů (NTP) a pufru k produkci mRNA transkriptů. Ideálního výtěžku RNA nelze dosáhnout jediným roztokem, protože je závislý na různých reakčních faktorech. Kromě toho může být IVT reakce závislá na sekvenci.
  • Po IVT reakci, nečistoty související s produktem a procesem (např. dsRNA, zkrácené fragmenty RNA, templát DNA, NTP a RNA polymeráza) by měly být odstraněny, aby se získala čistá mRNA jako aktivní farmaceutická složka (API).
mRNA procesní řešení Yaohai Bio-Pharma

Naše dostupné obecné služby vývoje procesů mRNA zahrnují:

  • Vývoj a optimalizace lineárního plasmidového procesu
  • Vývoj a optimalizace procesů IVT
  • Vývoj a optimalizace procesu čištění mRNA
Metodologie

Kvalita podle návrhu (QbD)

Design of Experience (DoE)

Jeden faktor v čase (OFAT)

Podrobnosti služby
Podrobnosti služby Operace jednotky parametry
Jednoenzymové trávení Reakce trávení Složky reakce, objem, rychlost otáčení
Linearizované čištění DNA IEX, Aniontová nebo kationtoměničová chromatografie Typy chromatografické pryskyřice/kolony Složení pufru, složení mobilní fáze, pH, průtok, vazebné, promývací a eluční podmínky.
RPC, chromatografie na reverzní fázi
Syntéza mRNA metodou IVT IVT reakce Složky reakce IVT, objem, rychlost otáčení, doba IVT
odstranění DNA Koncentrace DNázy
Enzymatický uzávěr Uzavírací reakce Složky reakce, objem, rychlost otáčení
Purifikace mRNA AC, Afinitní chromatografie Několik typů chromatografické pryskyřice/kolony (např. AC, IEX, RPC, SEC, MMC), složení pufru, objem nástřiku, složení mobilní fáze (adsorpce a desorpce), pH, průtok, podmínky vazby, promývání a eluce.
IEX, aniontová nebo kationtoměničová chromatografie
SEC, odsolování a/nebo vylučovací chromatografie
RPC, chromatografie na reverzní fázi
MMC, smíšená chromatografie
Filtrace s tangenciálním tokem Materiál membrány a velikost pórů, průtoková rychlost, transmembránový tlak (TMP), poměr objemu filtrátu k ploše membrány
Časová osa řešení mRNA CDMO

图片

Získejte zdarma nabídku

Ozvěte se nám