Disulfidové vazby se někdy nazývají SS vazby nebo disulfidové můstky. Disulfidové můstky ovlivňují biologickou aktivitu biologických látek, jako jsou peptidy, proteiny a protilátky.
Yaohai Bio-Pharma nabízí služby analýzy disulfidových vazeb založené především na kapalinové chromatografii a hmotnostní spektrometrii (LC-MS).
Podíleli jsme se na proteinové strukturní charakterizaci různých velkých molekul, včetně rekombinantních podjednotkových vakcín, nanoprotilátek/VHH/jednodoménových protilátek (sdAbs), fragmentů protilátek, hormonů/peptidů, cytokinů, růstových faktorů (GF), enzymů, kolagenů, atd.
Regulační požadavky na disulfidové vazby
Existují různé počty a formace disulfidových můstků v různých biologických látkách, které by měly být plně posouzeny během studií charakterizace proteinů, pokud očekávaná primární aminokyselinová sekvence produktu obsahuje aminokyselinu cystein. To také vyžaduje regulační dokument ICH Topic Q6B.
Analytické metody
Analýza |
Metody |
Disulfidové vazby |
Kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (LC-MS) po digesci |
Pro potřebná data plného hodnocení disulfidových můstků a volných thiolů provádějí vědci z Yaohai Bio-pharma mapování peptidů po trávení pomocí specifické proteázy. Poté analyzujte pomocí on-line LC/elektrosprejové ionizační hmotnostní spektrometrie (ES-MS) a/nebo LC/ES-MS/MS před a po redukci.
Yaohai Bio-pharma může také provést Ellmanův test, který je důležitou součástí jakéhokoli hodnocení produktu s plným cysteinem. V rámci Ellmanova testu derivatizujeme sulfhydryly pomocí (5,5'-dithio-bis-[2-nitrobenzoové kyseliny]). Pro stanovení hladin volných thiolů se výsledný produkt analyzuje UV spektrofotometrií při 412 nm.