Привет. Вы когда-нибудь задумывались, как учёные могут клонировать РНК? РНК — это особая молекула, которую мы находим в наших клетках, и она делает много вещей для производства белков, а белки нужны, чтобы наш организм мог правильно функционировать. В этом выпуске мы проведём пошаговый обзор гораздо более интересного протокола, используемого исследователями: транскрипции in vitro. Это просто означает, что учёные производят много РНК в пробирке (это маленькая баночка, которую используют лаборатории), так что давайте разберём каждый шаг.
Закончив свой предыдущий пост, я осознал, что последний мог быть немного сухим — присоединяйтесь к веселью в мокрой лаборатории; так что, продолжая тему, теперь, когда вы уже находитесь на поезде веселья (т.е. производства РНК): какие реактивы вам понадобятся для вашего ЭФ?? Чтобы этого достичь, нам потребуются специальные белки, называемые ферментами, аналогичные продукту Yaohai Производство рекомбинантного мидкина . Оно катализирует химические реакции, эти ферменты помогают в расщеплении. Теперь нам нужен только наш участок ДНК. Эта функция — это ДНК, которую мы используем как шаблон для копирования РНК. Также требуются дополнительные регуляторные последовательности в РНК, а именно нуклеотиды. Эти нуклеотиды похожи на маленькие строительные блоки, которые нужно собрать, чтобы создать РНК. Мы также используем короткие трубки малого диаметра для оценки вкуса в других экспериментах. Наконец, нам нужна машина (термостат), которая обеспечивает правильную температуру наших реакций. Кроме того, для определённых экспериментов могут потребоваться некоторые инструменты и материалы.
Здесь пути расходятся: у нас есть один РНК-штамм, и теперь мы хотим получить больше копий этого штамма, также Производство конъюгированных ВЧД-вакцин разработанный Яохаем. Способ достижения — использование другого фермента; полимеразы РНК T7. Этот уникальный фермент, например, распознает специфические области внутри РНК. Используется для создания большего количества копий РНК в дальнейшем процессе. На этом этапе к РНК-цепи будет добавляться больше участков полимеразой РНК T7 до тех пор, пока не будет создан большой объем транскрипта или пока мы не скажем ей остановиться.
После того, как мы изолировали РНК настолько, насколько это возможно, прокрутите ниже, чтобы узнать, как очистить и хранить РНК для будущего использования. Роудс: Некоторые из этих методов несколько экстремальны в терминах изоляции РНК — вы не всегда будете их использовать, но иногда для определённых типов экспериментов это необходимо. Как только наша РНК станет свободной от любых загрязнителей, её можно хранить замороженной. Таким образом, она сохраняется, и мы можем использовать её позже в различных экспериментах.
Качество исходного материала: убедитесь, что ваш шаблон ДНК чистый и не повреждён. Вы также можете добавить свежеприготовленные нуклеотиды и недавно размороженные ферменты, чтобы максимально увеличить шансы на успешный эксперимент.
Настройка условий: Все ферменты и их нуклеотиды работают лучше при определённой температуре и pH внутри вашего тела, а также тела Яохая. Красная флуоресцентная РНК . Теперь немного подстройте условия, пока не найдёте ключевые параметры для вашей уникальной установки.
Обратная транскриптаза — это необычный фермент, так как она создает копию ДНК из молекулы РНК. Мы использовали как ДНК, так и шаблон ДНК (cDNA) в качестве входных данных для нашего метода in vitro транскрипции для получения РНК. Однако, в большинстве экспериментов ученые хотели бы транскрибировать ДНК в РНК. Обратная транскрипция дала свое название этому процессу. тестирование распределения полия РНК создано компанией Yaohai. Это бесценный инструмент во всей науке — от изучения молекул РНК внутри клеток до производства комплементарных цепочек ДНК для дальнейших экспериментов.
В реальных экспериментах, где РНК является одной из самых распространенных молекулярных технологий, наряду с продукцией компании Yaohai. Производство ВЧ-вакцин в E. coli количественные анализы: Эти тесты могут показать количество любого конкретного молекулы, присутствующей в образце. Например, ученые могут синтезировать подготовку транскриптов in vitro из копий РНК, полученных из целевого гена, расположенного внутри клетки. Диагностика может затем провести анализ этих копий; если ищут РНК, диагностика может использовать полимеразную цепную реакцию (ПЦР), чтобы усилить эти копии в образце. Это позволяет ученым увидеть, как гены выражаются в клетках, и даже позволяет проводить некоторые высокоэффективные анализы, например, наличие бактериальной или вирусной инфекции, а также диагностировать генетические заболевания.
in vitro Transcript Protocol является лидером в области CDMO микробиологических биопрепаратов. Наш фокус направлен на микробиологически производимые вакцины и терапевтические препараты, которые подходят для управления здоровьем человека, животных и домашних питомцев. У нас есть самые передовые платформы РИ и технология производства, охватывающие весь процесс, начиная от разработки микробных штаммов и банков клеток, до разработки процессов и методов, а также коммерческого и клинического производства, что обеспечивает успешную доставку инновационных решений. Со временем мы накопили обширные знания в области микробиологической биообработки. Более 200 проектов были успешно завершены, и мы помогаем нашим клиентам соблюдать регуляторные требования, такие как US FDA и EU EMA. Мы также помогаем им ориентироваться в требованиях Australia TGA и China NMPA. Наша профессиональная экспертиза и обширный опыт позволяют нам быстро реагировать на рыночные потребности и предоставлять индивидуальные услуги CDMO.
Yaohai Bio-Pharma имеет опыт в производстве биопрепаратов, созданных по протоколу транскрипции in vitro. Мы предлагаем индивидуальные решения для разработки и производства, гарантируя отсутствие рисков. Мы работали с различными модальностями, такими как субъединичные рекомбинантные вакцины, пептидные гормоны, цитокины, факторы роста, однообластные антитела, ферменты, плазмидная ДНК, мРНК и многим другим. Мы специализируемся на различных микроорганизмах, включая дрожжи с внеклеточной и внутриклеточной секрецией (доходность до 15 г/л) и бактерии с внутриклеточным растворимым веществом и inclusion body (доходность до 10 г/л). Мы также создали платформу ферментации BSL-2 для создания бактериальных вакцин. Мы сосредоточены на улучшении процессов, увеличении выхода продукции и снижении стоимости производства. Используя сильную технологическую команду, мы можем обеспечить своевременную и надежную доставку проекта, что поможет быстрее вывести ваш продукт на рынок.
Yaohai Bio-Pharma, один из десяти ведущих производителей биопродуктов, специализируется на микробиологической ферментации. Мы создали современное производство с мощными возможностями НИОКР и передовым оборудованием. У нас есть пять линий производства активных фармацевтических ингредиентов, соответствующих требованиям GMP для микробиологической ферментации и очистки. Также у нас есть две автоматизированные линии розлива для картриджей, флаконов и шприцев с готовым наполнителем. Масштабы ферментации варьируются от in vitro Transcript Protocol до 2000 литров. Спецификации для розлива в флаконы варьируются от 1 мл до 25 мл, а для шприцев или картриджей с готовым наполнителем — примерно от 1 до 3 мл. Наши производственные мощности, соответствующие стандартам cGMP, обеспечивают постоянную поставку клинических образцов и коммерческой продукции. Наше предприятие производит большие молекулы, которые поставляются во всем мире.
Yaohai BioPharma — одна из 10 ведущих микробиологических CDMO, которая использует протокол транскрипции in vitro, а также занимается регуляторными делами. У нас есть система управления качеством, соответствующая современным стандартам GMP и глобальным регулированиям. Наша команда экспертов по регуляторным вопросам хорошо разбирается в глобальных регуляторных рамках для ускорения запуска биопрепаратов. Мы гарантируем прослеживаемость производственных процессов, качество продукции и соблюдение правил FDA США и EMA ЕС. Регуляторные органы Австралии TGA и Китая NMPA также удовлетворены. Yaohai BioPharma успешно прошла проверку на месте от квалифицированного лица (QP) Европейского Союза для нашей системы качества GMP и производственных мощностей. Кроме того, мы успешно прошли первые сертификационные аудиты систем менеджмента качества ISO9001, экологического менеджмента ISO14001 и охраны труда и здоровья ISO45001.