Привет. Вы когда-нибудь задумывались, как ученые могут клонировать РНК? РНК — это особая молекула, которую мы находим в наших клетках, которая делает кучу вещей для производства белков, а белки находятся там, чтобы наше тело могло делать все правильно. В этой части мы рассмотрим гораздо более любопытный протокол, используемый исследователями: транскрипт in vitro. И все это означает, что ученые берут РНК и производят ее в большом количестве в пробирке (это такая маленькая баночка, которую используют в лабораториях), поэтому давайте рассмотрим каждый шаг здесь.
Закончив свой предыдущий пост, я понял, что последний, возможно, был немного суховатым постом «присоединяйтесь к веселью в мокрой лаборатории»; поэтому, придерживаясь формы теперь, когда вы полностью и по-настоящему в поезде веселья (sic RNA-making): Какие реагенты и т. д. понадобятся для вашего EF?? Чтобы добиться этого, нам понадобятся специальные белки, называемые ферментами, идентичные продукту Яохая Производство рекомбинантного мидкина. Он катализирует химические реакции, эти ферменты помогают в расщеплении. Так что теперь нам просто нужен наш кусочек ДНК. Эта функция — ДНК, которую мы используем в качестве шаблона для копирования для нашей РНК. Дополнительные регуляторные последовательности в РНК, а именно нуклеотиды, также необходимы. Эти нуклеотиды подобны крошечным строительным блокам, которые должны быть собраны для создания РНК. Мы также используем короткие трубки небольшого диаметра, чтобы объединить оценку вкуса в другую. Наконец, нам нужна машина (термоциклер), которая гарантирует, что наши реакции проходят при правильной температуре. Кроме того, нам могут потребоваться несколько инструментов и продуктов для определенных экспериментов.
Итак, здесь все расходится: у нас есть одна нить РНК, и теперь нам хотелось бы иметь больше ее копий, также Производство конъюгированных вакцин VLP разработанный Яохай. Способ достижения использования другого фермента; РНК-полимеразы Т7. Этот уникальный фермент, например, распознает определенные области внутри РНК. прыгающий конус для создания большего количества копий РНК в процессе. В этот момент к цепи РНК будет добавлено больше РНК-полимеразой Т7, пока не будет создана масса транскрипта, или пока мы не скажем ей остановиться.
После того, как мы изолировали РНК, насколько это возможно, прокрутите страницу вниз, чтобы узнать, как очистить и сохранить РНК для будущего использования. Роудс: Некоторые из этих методов немного более экстремальны с точки зрения выделения РНК — вы не всегда будете использовать это, но иногда для определенных типов экспериментов это необходимо. Как только наша РНК будет очищена от любых загрязнений, ее можно будет хранить в замороженном виде. Таким образом, это безопасно, и мы сможем использовать ее позже в различных экспериментах.
Качество исходного материала: убедитесь, что ваш шаблон ДНК чистый и не весь сгорел. Вы также можете дополнить его свежевосстановленными нуклеотидами и недавно размороженными ферментами, чтобы максимально увеличить шансы на успешный эксперимент.
Условия тонкой настройки Все ферменты и их нуклеотиды работают лучше при определенной температуре и pH внутри вашего тела, а также Яохай Красная флуоресцентная мРНК. Теперь немного подкорректируйте нюансы между условиями, пока не дойдете до того места, где находится ключ к вашей уникальной настройке.
Обратная транскриптаза — необычный фермент, поскольку он делает копию ДНК из молекулы РНК. Мы использовали как ДНК, так и шаблон ДНК (кДНК) в качестве входных данных для нашего метода транскрипции in vitro для генерации РНК. Однако в большинстве экспериментов ученые хотели бы транскрибировать ДНК в РНК. Обратная транскрипция — это то, откуда она и получила свое название, то же самое, что и Тестирование распределения мРНК поли-А Сделано Yaohai. Это бесценный инструмент для науки - от изучения молекул РНК внутри клеток до создания комплементарных цепей ДНК для дальнейших экспериментов.
Реальные эксперименты, в которых РНК является одним из наиболее часто используемых молекулярных инструментов, наряду с продуктом Яохай Производство вакцины VLP в E. coli. Количественные анализы: Эти тесты могут выявить количество любой конкретной молекулы, присутствующей в образце. Например, ученые могут синтезировать in vitro транскрипт-препарат копий РНК, полученных из целевого гена, расположенного внутри клетки. Диагностика может затем проанализировать эти копии, в случае, если они. Ища РНК, диагностика может запустить полимеразную цепную реакцию (ПЦР) для амплификации этих копий в образце. Это позволяет ученым увидеть, как гены экспрессируются в клетках, и даже позволяет проводить некоторые чрезвычайно высокопроизводительные анализы, такие как наличие бактериальной или вирусной инфекции, и диагностировать генетические нарушения.
Протокол транскрипта in vitro является ведущим в области микробной биологии CDMO. Мы сосредоточены на микробных вакцинах и терапевтических средствах, которые подходят для управления здоровьем человека, ветеринарии, а также домашних животных. У нас есть самые передовые платформы исследований и разработок и производственные технологии, которые охватывают всю процедуру, начиная с разработки микробных штаммов и создания банков клеток, разработки процессов и методов, коммерческого и клинического производства, что обеспечивает успешную доставку инновационных решений. Со временем мы накопили обширные знания в области микробной биообработки. Более 200 проектов были успешно завершены, и мы помогаем нашим клиентам соблюдать такие правила, как правила FDA США и EMA ЕС. Мы также помогаем им ориентироваться в Австралии TGA и Китае NMPA. Наши профессиональные знания и обширный опыт позволяют нам быстро реагировать на требования рынка и предоставлять индивидуальные услуги CDMO.
Yaohai Bio-Pharma имеет опыт в производстве биопрепаратов, созданных с помощью in vitro Transcript Protocol. Мы предлагаем индивидуальные решения в области исследований и производства, гарантируя отсутствие рисков. Мы занимаемся различными модальностями, такими как рекомбинантные субъединичные вакцины, пептидные гормоны, цитокины, факторы роста, ферменты однодоменных антител, плазмидная ДНК и РНК и многое другое. Мы являемся специалистами по многим микроорганизмам, включая внеклеточную и внутриклеточную секрецию дрожжей (выход до 15 г/л), а также внутриклеточные растворимые бактерии и тельца включения (выход до 10 г/л). Мы также создали платформу ферментации BSL-2 для создания бактериальных вакцин. Мы сосредоточены на улучшении процессов, увеличении выхода продукции и снижении производственных затрат. Используя сильную технологическую команду, мы можем обеспечить быструю и надежную реализацию проекта, которая быстрее выведет ваш продукт на рынок.
Yaohai Bio-Pharma, входящий в десятку крупнейших производителей биологических продуктов, специализируется на микробной ферментации. Мы построили современный объект с надежными возможностями НИОКР и передовым оборудованием. У нас есть пять линий по производству лекарственных веществ, которые соответствуют требованиям GMP для микробной ферментации и очистки. У нас также есть две автоматизированные линии розлива и финишной обработки для картриджей, флаконов и предварительно заполненных шприцев. Масштабы ферментации, доступные для использования, варьируются от протокола транскрипта in vitro до 10 л. Спецификации наполнения флакона варьируются от 2000 мл до 1 мл. Спецификации наполнения предварительно заполненных шприцев или картриджей варьируются примерно от 25 до 1 мл. Наше производственное предприятие, соответствующее требованиям cGMP, обеспечивает постоянную поставку клинических образцов, а также коммерческих товаров. Наш завод производит большие молекулы, которые отправляются по всему миру.
Yaohai BioPharma входит в десятку лучших микробных CDMO, которые включают протокол транскрипта in vitro, а также нормативные вопросы. У нас есть система управления качеством, которая соответствует текущим стандартам GMP, а также мировым нормам. Наша команда экспертов по регулированию имеет опыт в глобальных нормативных рамках для ускорения биологических запусков. Мы обеспечиваем прослеживаемые производственные процессы, качественные продукты, а также соблюдаем правила FDA США и EMA ЕС. Австралийская TGA и китайская NMPA также удовлетворены. Yaohai BioPharma успешно прошла аудит на месте квалифицированного лица (QP) Европейского союза для нашей системы качества GMP, а также нашего производственного объекта. Кроме того, мы прошли первые сертификационные аудиты системы менеджмента качества ISO10, системы экологического менеджмента ISO9001 и системы менеджмента охраны труда и техники безопасности ISO14001.