דאמידציה של שרשראות צד של גלוטמין ואספרגין היא שינוי נפוץ מבחינת ההשפעה על תכונות הביו-פרמצבטיקה של חלבון. Deamidation יכול להתרחש בשאריות גלוטמין, אך בדרך כלל בקצב נמוך בהרבה. שיעורי הדה-אמידציה מושפעים מהטמפרטורה, ה-pH, מבנה החלבון המקומי ושאריות אמינואציל צדדיות.
Yaohai BioPharma מציעה שירות בדיקת דה-אמידציה של חומצות אמינו, המאפשר לך לזהות דה-אמידציה של חומצות אמינו באמצעות Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS).
היינו מעורבים באפיון מבני החלבון של מולקולות גדולות שונות, כולל חיסונים רקומביננטיים של תת-יחידות, ננוגודים/VHHs/נוגדנים דומיינים בודדים (sdAbs), שברי נוגדנים, הורמונים/פפטידים, ציטוקינים, גורמי גדילה (CF), אנזימים, קולגנים, וכו '
דרישות רגולטוריות עבור Deamidation של חומצת אמינו
על פי הנחיות ICH Q6B, צורות דה-אמידות עשויות להיות מזוהות ומאופיינות בשיטות כרומטוגרפיות, אלקטרופורטיות ו/או שיטות אנליטיות רלוונטיות אחרות.
שיטות אנליטיות
| אָנָלִיזָה |
שיטות |
| דאמידציה |
כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS) |
נהלים
למשל, דאמידציה אספרטית
1. עיכול אנזימטי
2. LC-MS במצב High-Performance Liquid Chromatography (HPLC)
3. ניתוח נתונים
דה-אמידציה של אספרגין מתרחשת באמצעות תוצר ביניים של סוצ'ינימיד (Suc), הרגיש ל-racemization והידרוליזה, מה שמניב ארבעה איזומרים של Asp, כולל L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp ו-D-IsoAsp.
בתיאוריה, דה-אמידציה של Gln יכולה ליצור ארבעה איזומרי Glu תואמים באמצעות תהליך דומה ל-Asn-deamidation.
ספקטרומטריית המסה בעלת הרזולוציה הגבוהה מזהה בקלות את הבדל המסה של 1-Da בין פפטידים המכילים Asn/Gln לבין מקביליהם ה-deamidated Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
לא
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
