החשיבות של סינון אצווה
סינון של מארחים מתאימים הוא הכרחי לפיתוח CMC של מוצרים ביולוגיים, שקובע קובע את איכותם ואת התואמות של תהליך הייצור. המטרה הישירה של סינון המארח היא להציע בנק תאים ראשוני (PCB) עם רמות ביטוי גבוהות וביציבות גבוהה הן במונחי יציבות מעבר והן ביציבות אחסון. סינון של מארח מתאים הכרחי לשתי סיבות עיקריות:
- בראשונה, כדי לבחור באורגניזם מיקרובי עם רמת ביטוי גבוהה. ישנן מספר אצווה מסחריות זמינות המשמשות לביטוי סוגי חלבונים שונים, כמו חלבונים רעילים, חלבונים פתירים או חלבונים יוקריוטיים.
- שנית, מסננים את המארח עם יציבות גנטית. בדיקת יציבות גנטית היא נקודת מפתח לכל אורך מחזור הייצור. מומלץ להכיר ביציבות גנטית גבוהה כמאפיין נוסף של חשיבות קריטית עבור תרבית מתאימה.
מילים מפתח: בחירת תרבית מיקרובית, מסננות תרבית מיקרובית, מסננות בגודל גדול של חיידקים או שמרים, מסננות תרבית יוצרת בכמות גדולה, מסננות תרבית יציבה מאוד, מסננות תרבית יציבה גנטית תחום: רפואת אדם, רפואת בעלי חיים, חיסונים, ביולוגיה סינתטית, ביולוגיים מולקולריים גדולים רקורסנטיים, תרכובות ביולוגיות
שירותי מסננות תרבית של Yaohai Bio-Pharma
ממשיכים ליהנות מיותר מ-10 שנים של נסיון ב-CDMO בתחום הביולוגיים המיקרוביאליים, אנו תומכים בהתקדמות ובייצור של מגוון מולקולות גדולות, כולל חיסונים תת-יחידה רקורסנטיים, חלקיקים דומים לנגיף (VLP), הורמונים (אינסולין, GLP-1, הורמון צמיחה), ציטוקינים (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), גורמי צמיחה (EGF, FGF, NGF), ננוגופים/אנטיבדיז סינגל-דומיין (sdAbs), אנזימים, וכו'.
אנו אספנו נסיון עשיר בחירתם של מגוון וקטורים פלסמידים ומארחים מיקרוביאליים, כולל חיידקים Escherichia coli (E. coli), ולסוכרים Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). אנו יכולים למצוא את מערכת הביטוי הטובה ביותר עבור הביולוגיים הייחודיים שלך.
אtinghamנו מגוון מארחים מיקרוביאליים עם מקורות ברורים ו- CoA סטנדרטיים, כולל Coli ביטוי בשחלה וביצורים.
פרטי שירות
שירותים
|
פרטי שירות
|
קו זמן מינימלי/יום
|
תוצרי עבודה
|
בניית זן (E. coli)
|
העתקת פלזמיד (מארחים מרובים)
|
5
|
תעודת תקינות של מארחים מסחריים דיווח על בניית זן
|
אימות PCR
|
טהרת זן
|
שימור זן
|
בניית זן (חמצן)
|
הכנה של תאים יסטים מתאימים
|
10
|
ליניאריזציה של פלזמיד
|
אלקטרוטרנספורמציה
|
CREENING למחסור תזונתי או התנגדות
|
טהרת זן
|
שימור זן
|
CREENING מארח מתאים
|
הפרדת DNA של פלזמיד או גנום
|
15-20
|
תהליך סינון המארח COA של אצגונים מהנדסים
|
אימות PCR, חיתוך עם אנזים מגבנה
|
סידור גן מטרה
|
סינון של מארחים עם ביטוי גבוה
|
סינון של מארחים עם יציבות גנטית
|
שימור זן
|
מחקר מקרה
מארח מתאים משפר את רמת ביטוי הפרוטאין פי 2.5.
הוּאֻמְנוּ לְהַפְתִּיח שֶׁטָחִים מְגַלְיָן בְּמִדָּה גְדוֹלָה E. coli שֶׁטָח. וְנִסִּינוּ שְׁלֹשָׁה כִּינִים תְּחוּמִיִם E. coli מְזַמְנִים, עַל פִּי תְּאוּמֵי הַבֶּעֱרָה הַמַּבְקִיעַ. נִרְאֶה שֶׁהַשֶּׁטַח S1-1 ו-S1-2 (תְּמוּנָה א: קוֹלָן 1,2) שִׁבְּתוּ אֶת מַדֵּי הַבֶּעֱרָה לְמַעְלָה לְ3.5 פַּעַם מִן הַשֶּׁטַח הָרִאשׁוֹנִי שֶׁל הַיּוֹצֵר (תְּמוּנָה א: קוֹלָן 3).
לְבַד מִזֶּה, הַשֶּׁטַח S1-1 הִרְכִּיב סְתִימַת יְחָסוֹת גְּנֵטִית גְּדוֹלָה (תְּמוּנָה ב), וְנֶהְגַּד כְּשֶׁטַח מְלוּבָּשׁ לְהַפְקָדַת תְּאֵי רִאשׁוֹנִיִּים (PCB).

תְּאֻמֵי הַשְּׁרָתוֹת שֶׁלָּנוּ
מְצִיאָה מוּצְלֶחֶת עִם מִקְרָבִים מִשְׁתַּנִּים, לְמָשָׁל, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink סטראין 1/2/3/4; S. cerevisiae ו H. polymorpha .
יש לנו ניסיון עם E. coli ספיגת פרוטאין בפריפלזמה, ביטוי פתור ובתי חיתוך, וכן ביטוי פנימי או ספיגת פרוטאין בסוכרים. אנו לא מוסיפים אנטיביוטיקה או מוסיפים אותם תחת הנחיות רגולטוריות.
מפתחים פלטפורמה של מסך מהיר כדי לזהות סטראינים בעלי ייצור גבוה ויציבים מתוך יותר מאה סטראינים מועמדים.
מובטח שהпроцס של הנדסת צבעונים והסינון הוא נתון לעקיבה, תחת ניהול טוב של נתונים ורשומות.