Enzime cheie pentru producerea de ARN lung
ARNm, ca tip de ARN cu codare lungă, a funcționat în siguranță și eficient la o gamă mai largă de oameni în timpul COVID-19. Alte ARN-uri cu codificare lungă, cum ar fi ARN-ul cu autoamplificare (saRNA) și ARNm circular (circRNA) au arătat, de asemenea, eficiență în studiile preclinice și clinice.
Producția la scară largă de ARN cu codare lungă se bazează pe transcripția in vitro (IVT) prin mai multe reacții enzimatice. Etapele producției de ARN includ prepararea ADN-ului șablon, sinteza ARN IVT, circulația, îndepărtarea ADN-ului, modificarea ARN (capping și coada) și purificarea ARN.
Există mai multe enzime cheie utilizate în producția de ARN cu codificare lungă (de exemplu, ARNm, saRNA și circRNA), inclusiv endonucleazele de restricție, ARN polimeraza T7 (T7 RNAP), inhibitorul de RNază, pirofosfataza anorganică, DNaza I, enzima de acoperire vaccinia și RNaza R.
|
Proces
|
Enzimă
|
Funcţie
|
|
Pregătirea ADN-ului șablon
|
Endonucleaze de restricție
|
Liniarizarea ADN-ului plasmid (pDNA) pentru a evita generarea de transcript mai lung.
|
|
Sinteza ARN IVT
|
T7 ARN polimeraza (T7 RNAP)
|
Se leagă de promotorul T7 și generează transcriptul ARN specific; Joacă un rol cheie în timpul reacției IVT.
|
|
Inhibitor de RNază, recombinant
|
Inhiba activitatea RNazelor în timpul reacției IVT.
|
|
Pirofosfatază, anorganică (iPPase)
|
Preveniți pirofosfatul în timpul reacției IVT.
|
|
îndepărtarea ADN-ului
|
ADNza I
|
Îndepărtați șablonul ADN.
|
|
modificarea ARN
|
Enzima de acoperire a vaccinului
|
Adăugați structuri Cap1 la capetele 5′ ale ARNm IVT.
|
|
2'-O-metiltransfere
|
|
îmbogățirea circARN
|
RNaza R
|
Digerați ARN-ul liniar și îmbogățiți ARN-ul circular.
|
Yaohai Bio-Pharma oferă o soluție CDMO unică pentru enzime
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NU
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
