Reactiv enzimatic

Modalitatea

Proteaze de îndepărtare a etichetelor

Pentru a îmbunătăți solubilitatea și a simplifica procesul de purificare a proteinelor recombinante, cercetătorii adaugă de obicei etichete de fuziune, dintre care eticheta His, proteina de legare a maltozei (MBP) și glutation-S-transferaza (GST) sunt utilizate în mod obișnuit.

Deși este marcată ca o secvență suplimentară de proteine, aceasta ar trebui eliminată pentru a menține activitatea biologică în industria farmaceutică. Îndepărtarea etichetelor de fuziune necesită proteaze specifice locului, cum ar fi enterokinaza (EK), trombina, proteaza virusului de gravare a tutunului (TEVp), proteaza 3C a rinovirusului uman (HRV3C), proteaza mică de modificare a ubiquitinei (SUMO), virusul petelui din vene de tutun ( TVMV) protează și carboxipeptidaza A/B (CPA/CPB).

Tip	Enzimă	Site de recunoaștere
Endoproteazele de îndepărtare a etichetelor	Enterokinaza (EK), Enteropeptidaza	DDDDK↓
	Trombina	LVPR↓GS
	proteaza TEV	ENLYFQ↓G
	proteaza HRV3C	LEVLFQ↓GP
	SUMO proteaza	Structura terţiară SUMO
	proteaza TVMV	ETVRFQG↓S
Exoproteazele de îndepărtare a etichetelor	Carboxipeptidaza A (CPA)	Aminoacizii C-terminali, cu excepția Pro, Lys și Arg
Exoproteazele de îndepărtare a etichetelor	Carboxipeptidaza B (CPB)	Lys C-terminal și Arg

Alte proteaze

aplicație	Enzimă	Funcţie
Alte proteaze	Proteaza K	O serin protează care digeră proteinele prin hidroliza legăturilor peptidice.
	IdeS, proteaza IgG	Enzime de degradare a IgG (Ide) care se scindează la un loc specific al imunoglobulinei G (IgG), generând fragmente Fab și Fc
	proteaza IgA1	O enzimă proteolitică care scindează un situs specific din secvența regiunii balama a imunoglobulinei umane A1 (IgA1).

Nuclează

aplicație	Enzimă	Funcţie
Nuclează	Nuclează	Scinda acizii nucleici (ADN sau ARN) prin hidroliza legăturilor fosfodiester.
Nuclează	Restricționează enzima	O endonuclează care scindează ADN-ul la sau în apropierea unor locuri specifice.

Amidaza

aplicație	Enzimă	Funcţie
Amidaza	PNGase F	Se scindează între resturile de GlcNAc cele mai interne și de asparagină ale oligozaharidelor complexe, hibride și de manoză.

toate categoriile

Reactiv enzimatic

Modalitatea