Reagent enzymatic

Reagent enzymatic

Modalitate

Proteaze pentru eliminarea etichetelor

Pentru a îmbunătăți solubilitatea și a simplifica procesul de purificare al proteinelor recombinante, cercetătorii adaugă de obicei etichete de fusionare, dintre care cele mai utilizate sunt His-tag, proteină legată de maltoză (MBP) și glutation-S-transferază (GST).

Deși este etichetat ca o secvență suplimentară de proteină, aceasta trebuie eliminată pentru a menține activitatea biologică în industria farmaceutică. Eliminarea etichetelor de fusionare necesită proteaze site-specific, cum ar fi enterocina (EK), trombină, proteaza virusului tabacului (TEVp), proteaza virusului uman rhinovirus 3C (HRV3C), proteaza mici a proteinului modificator ubiquitin (SUMO), proteaza virusului cu strânța veinală a tabacului (TVMV) și carboxipeptidaza A/B (CPA/CPB).

TIP	Enzim	Sistem de recunoaștere
Proteaze endo pentru eliminarea etichetelor	Enterokinaza (EK), enteropeptidaza	DDDDK↓
	Trombina	LVPR↓GS
	Proteaza TEV	ENLYFQ↓G
	Proteaza HRV3C	LEVLFQ↓GP
	Proteaza SUMO	Structura terciară SUMO
	Proteaza TVMV	ETVRFQG↓S
Exoproteaze pentru eliminarea tag-urilor	Carboxipeptidaza A (CPA)	Aminoacizi terminali C, cu excepția Pro, Lys și Arg
Exoproteaze pentru eliminarea tag-urilor	Carboxipeptidaza B (CPB)	Lys și Arg terminali C

Alte proteaze

Aplicare	Enzim	Funcție
Alte proteaze	Proteaza K	O proteaza serină care digeste proteinele prin hidrolizarea legăturilor peptidice.
	IdeS, proteaza IgG	Enzime degradante IgG (Ides) care taie la un sit specific al imunoglobulinului G (IgG), generând fragmentele Fab și Fc
	Proteaza IgA1	O enzymă proteolitică care scinde un sit specific din secvența de regiune hinge a imunoglobulinului A1 uman (IgA1).

Nuclease

Aplicare	Enzim	Funcție
Nuclease	Nuclease	Taie acidele nucleice (ADN sau ARN) prin hidrolizarea legăturilor fosfodiester.
Nuclease	Restrict enzyme	O endonuclează care taie ADN-ul la sau în apropierea siturilor specifice.

Amidază

Aplicare	Enzim	Funcție
Amidază	PNGase F	Scinde între GlcNAc-ul cel mai intern și reziduurile de asparagină ale oligosaharidelor cu mannозă înaltă, hibridelor și complexelor.

Toate categoriile

Reagent enzymatic

Modalitate