Rekombinant enzym for terapeutisk bruk
Terapeutiske enzymer oppnådd gjennom bioteknologiske prosesser er mye brukt til flere kliniske anvendelser, inkludert enzymerstatningsterapi, nedbrytning av akkumulerte metabolitter og toksin, kreftbehandling og genomredigering. Flere terapeutiske enzymer kan produseres i mikrobielt ekspresjonssystem.
| Søknad |
Enzyme |
Substans |
Typiske produkter/rørledninger |
| Enzymerstatningsterapi |
Adenosindeaminase, ADA |
Adenosin eller deoksyadenosin |
Elapegademase-lvlr (Revcovi) |
| Fenylalanin ammoniakklyase, PAL |
Fenylalanin |
Pegvaliase-pqpz (Palynziq) |
| Nedbrytning av akkumulerte metabolitter |
Urikase/Uratoksidase |
Urinsyre |
Peglticase (Krystexxa)Rasburicase (Fasturtec) |
| Kollagenase |
Kollagen "arr" |
Kollagenase clostridium histolyticum (Xiaflex, Qwo, Santyl) |
| Avkortet humant plasmin |
Kollagen, fibronektin og laminin |
Ocriplasmin (Jetrea) |
| Trunkert vevsplasminogenaktivator (tPA) |
Plasminogen |
Reteplase (Retavase) |
| IgG-protease |
Immunglobulin G (IgG) |
Imlifidase (Idefrix) |
| IgA-protease |
Immunoglobulin A (IgA) |
PKU308/AP308IGAN IgA-protease |
| Toksin nedbrytning |
Karboksypeptidase G2 |
Methotrexate |
Glukarpidase (Voraxaze) |
| Kreftbehandling |
Asparaginspesifikt enzym |
asparagin |
Asparaginase (Elspar) Calaspargase pegol-mknl (Asparlas) |
| Genom redigering |
Cas9 nuklease |
Målgen |
Exagamglogen autotemcel (Exa-cel, CTX001) |
Rekombinant enzym som materiale
Det er flere enzymer som brukes i produksjon av lang kodende RNA (f.eks. mRNA, saRNA, circRNA), produksjon av antistoff-medikamentkonjugater (ADC) og andre. Mikrobielt produserte enzymer er mer kostnadseffektive enn pattedyrceller, spesielt E. coli-ekspresjonssystem.
| Søknad |
Enzyme |
Funksjon |
| Enzymer for lineær RNA-produksjon, RNase-fri |
Restriksjonsendonukleaser |
Linearisering av plasmid-DNA (pDNA) for å unngå å generere lengre transkripsjon. |
| T7 RNA polymerase (T7 RNAP) |
Bind til T7-promotoren og generer spesifikt RNA-transkript; Spille en nøkkelrolle under in vitro transcript (IVT) reaksjon. |
| Vaksinia-dekke enzym |
Legg Cap-strukturer til 5′-endene av IVT-mRNA. |
| Pyrofosfatase, uorganisk (iPPase) |
Forhindre pyrofosfat under IVT-reaksjon. |
| RNase-hemmer, rekombinant |
Hemmer RNase-aktivitet under IVT-reaksjon. |
| DNase I |
Fjern DNA-malen. |
| Enzym for circRNA-produksjon, RNase-fri |
RNase R |
Fordøy lineært RNA og berik sirkulært RNA. |
| Enzymmediert glykankonjugering |
Peptid-N-glykosidase (PNGase F) |
Spalter amidbindingen mellom det første sakkaridet GlcNAc og Asn297-sidekjedenL; Frigjør glykaner fra IgG-antistoffer. |
| Bakteriell transglutaminase (BTG) |
Konjuger nyttelaster stedspesifikt for å generere ADC-er. |
| Sortase A |
Katalysere ligering av proteiner. |
| β1,4-galaktosidase |
Frigjør alle terminale galaktoser og danner en homogen G0-isoform av antistoffet. |
| β1,4-galaktosyltransferase (Gal-T) |
Overfør en sukkerrest med en kjemisk reaktiv funksjonell gruppe. |
| α2,6-sialyltransferase (Sial T) |
Inkorporer terminale sialinsyrerester i den native glykanstrukturen til et antistoff. |
| Enzymmediert glykanremodellering og glykoengineering |
Endo-N-acetylglukosaminidase (ENGase) |
Hydrolyser β1,4-glykosidbindingen mellom GlcNAcβ1–4GlcNAc av N-glykaner; Fjern N-koblede glykaner på Fc-regionen til IgG-antistoffer. |
| Endoglykosidase S (EndoS) |
|
| Glykosyltransferaser (GT) |
Overfør N-glykan-oksazolin til defukosylerte IgG-er. |
| andre |
Enzymer produsert av mikrobiell stamme |
Tilpasset behov |
Rekombinant enzym som reagens
Proteaser for fjerning av merkelapper
Fusjonsmerker brukes ofte for å forbedre løseligheten og stabiliteten til rekombinante proteiner av interesse og gjøre dem lettere å renses. De vanligste taggene inkluderer His-tag, maltosebindende protein (MBP), glutation-s-transferase (GST), etc.
Vanligvis legges en linkersekvens til mellom fusjonsmerket og målproteinsekvensen for å fjerne merkelappen. Fjerning av fusjonsmerker krever stedsspesifikke proteaser, slik som enterokinase (EK), trombin, tobakksvirusprotease (TEVp), human rhinovirusprotease 3C (HRV3C), liten ubiquitinmodifiserende protein (SUMO) protease, tobakksveneflekkvirus ( TVMV) protease og karboksypeptidase A/B (CPA/CPB).
| typen |
Enzyme |
Gjenkjennelsesside |
| Tag-fjerning endoproteaser |
Enterokinase (EK), enteropeptidase |
DDDDK↓ |
| trombin |
LVPR↓GS |
| TEV protease |
ENLYFQ↓G |
| HRV3C protease |
LEVLFQ↓GP |
| SUMO protease |
SUMO tertiær struktur |
| TVMV-protease |
ETVRFQG↓S |
| Eksoproteaser for fjerning av merkelapper |
Karboksypeptidase A (CPA) |
C-terminale aminosyrer, bortsett fra Pro, Lys og Arg |
| Karboksypeptidase B (CPB) |
C-terminal Lys og Arg |
Andre proteaser, nukleaser og amidaser
| Søknad |
Enzyme |
Funksjon |
| Andre proteaser |
Protease K |
En serinprotease som fordøyer proteiner ved å hydrolysere peptidbindinger. |
| IdeS, IgG-protease |
IgG-nedbrytende enzymer (Ides) som spalter på et spesifikt sted for immunglobulin G (IgG), og genererer Fab- og Fc-fragmenter |
| IgA1-protease |
Et proteolytisk enzym som spalter et spesifikt sted i den humane immunglobulin A1 (IgA1) hengselregionsekvensen. |
| Nuklease |
Nuklease |
Spalter nukleinsyrer (DNA eller RNA) ved å hydrolysere fosfodiesterbindingene. |
| Begrens enzym |
En endonuklease som spalter DNA på eller nær bestemte steder. |
| Amidase |
PNGase F |
Spalter mellom det innerste N-acetylglukosamin (GlcNAc) og asparaginrester av høy mannose-, hybrid- og komplekse oligosakkarider. |
Yaohai Bio-Pharma tilbyr One-Stop CDMO-løsning for rekombinante enzymer
- Mikrobiell stammeteknikk og screening
- Mikrobiell cellebank (PCB/MCB/WCB)
- Oppstrøms prosessutvikling
- Nedstrøms prosessutvikling
- Formuleringsutvikling
- GMP-produksjon
- Fyll og fullfør
- Analytisk og testing
- Reguleringssaker
Referanse:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Fortiden, nåtiden og fremtiden til enzymbaserte terapier. Drug Discov i dag. 2022 Jan;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
