Betydningen av belastningsteknikk
Strain engineering tar sikte på å gjøre uttrykket vert med egenskaper av forventninger, som er nødvendig for biologiske CMC-utvikling og bestemmer kvaliteten og konsistensen av produktet og produksjonsprosessen.
Nøkkelord: strain genteknologi og screening, proteinekspresjon stamme konstruksjon, mikrobiell celle engineering, bakteriestamme engineering, yeast strain engineering, prokaryot mikroorganisme konstruksjon, eukaryot mikroorganism engineering, engineered strain
Bruksområde: humanmedisin, dyremedisin, vaksine, syntetisk biologi, rekombinante store molekyler, biologisk reagens
Strain Engineering Services av Yaohai Bio-Pharma
Ved å dra nytte av over 10 års CDMO-erfaring innen mikrobiologisk biologi, har vi akkumulert rik erfaring med utvikling og seleksjon av ulike typer plasmidvektorer og mikrobielle verter (bakterier, gjær). Vi kan finne det beste uttrykkssystemet for dine unike biologiske stoffer.
Vi samlet ulike mikrobielle verter med klare kilder og standard CoA, bl.a
Bakterie: Escherichia coli (E. coli)
Gjær: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Tjenestedetaljer
Tjenester
|
Tjenestedetaljer
|
Minimum tidslinje/dag
|
leveransen
|
Strain Engineering
|
Gen-knock-out, eller gen-sletting
|
TBD
|
Strain engineering rapport
|
Gen knock-in, eller geninnsetting
|
Strain Construction (E. coli)
|
Plasmidtransformasjon (multiverter)
|
5
|
COA for kommersielle verter,
Stamkonstruksjonsrapport
|
PCR-verifisering
|
Stammerensing
|
Stammekonservering
|
Stammekonstruksjon (gjær)
|
Forberedelse av kompetente gjærceller
|
10
|
Plasmid linearisering
|
Elektrotransformasjon
|
Resistens/Ernæringsmangelscreening
|
Stammerensing
|
Stammekonservering
|
Egnet vertsscreening
|
Plasmid- eller genom-DNA-ekstraksjon
|
15-20
|
Vertsscreeningsprosess,
Testrapport for konstruerte stammer
|
PCR-verifisering, restriksjonsenzymfordøyelse
|
Målgensekvensering
|
Screening av høyekspresjonsverter
|
Screening av verter med genetisk stabilitet
|
Stammekonservering
|
case Study
Konstruert Hansenula polymorpha forbedret HPV L1 VLP-ekspresjonsutbytte.
Vi har etablert gjær Hansenula polymorpha (H. polymorpha) engineering og screening plattform for rekombinante proteiner/peptider uttrykk. For det første genererte vi H. polymorpha protease-mangelstammer ved målrettet gensletting. For det andre ble en vektor som bærer HPV L1-genet transformert til den kompetente H. polymorpha celle. Til slutt screener vi den beste klonen fra hundrevis av alternativer, med genetisk stabilitet og høyproduserende egenskaper.
Våre tjenestefunksjoner
Vi har demonstrert ekspertise på ulike mikrobielle verter, f.eks. Escherichia coli (E. coli) DH5a, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink stamme 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) og Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Vi har erfaring med E. coli periplasmatisk sekresjon, løselig og inklusjonskroppsekspresjon, samt intracellulær gjær eller sekresjonsekspresjon.
Vi tilsetter ingen antibiotika eller legger til antibiotika under regulatorisk veiledning.
Vi etablerer en screeningsplattform med høy gjennomstrømning for å screene høyproduserende og stabile stammer fra over hundre kandidatstammer.
Vi sørger for at prosessen med strain engineering og screening er sporbar, under Good Data and Record Management.