Alle categorieën
ENEN
Minicirkel-DNA

Minicirkel-DNA

Home >  Modaliteit  >  Nucleïnezuren  >  Minicirkel-DNA

Modaliteit

Minicirkel-DNA

Minicircle DNA (mcDNA) is een kleinere niet-virale DNA-vector die is afgeleid van een ouderlijke plasmide-DNA-achtige structuur. Minicirkel-DNA verschilt van conventioneel plasmide-DNA doordat het een promoter en een gen van interesse (GOI) bevat, zonder oorsprong van replicatie (ORI) en selectiemarker (selMark). Minicirkel-DNA wordt in bacteriën geproduceerd door middel van in vivo recombinatie om extra sequenties (mini-plasmide genoemd) uit plasmide-DNA te verwijderen. Vanwege de veiligheid ervan is minicirkel-DNA populair geworden als niet-virale vector voor gentherapie, DNA-vaccins, enz.

图片

Figuur 1. Structuur van plasmide-DNA (pDNA) en minicirkel-DNA (mcDNA)

Minicirkel-DNA-recombinatiesystemen

Er zijn vier belangrijke in vivo recombinatiesystemen voor minicirkel-DNA die zijn onderzocht, waaronder faag λ-integrase, faag P1 Cre-recombinase, ParA-resolvase, PhiC31 integra se/I-SceI.

Strategie

Faag λ integrase

Faag P1 Cre-recombinase

ParA opgelost

PhiC31 integreert se/I-SceI

Mechanisme

Tyrosinerecombinase, dat via de eiwitten FIS en IHF functioneert om de recombinatie van att-hybride plaatsen te katalyseren

Plaatsspecifiek tyrosinerecombinase, dat een bidirectionele recombinatie uitvoert bij binding aan loxP-plaatsen

Serinerecombinase, dat een onomkeerbare en unidirectionele recombinatie tussen twee identieke MRS-sites uitvoert

Serinerecombinase, dat unidirectionele recombinatie tussen attP / attB-bindingsplaatsen bemiddelt, terwijl I-SceI-endonuclease de productgerelateerde onzuiverheden en het niet-gerecombineerde ouderlijke plasmide splitst

Kenmerken

Afhankelijk van de expressie van gastfactoren FIS en IHF; intrinsieke toxiciteit; Resterend ouderlijk plasmide en mini-plasmide

Resterend ouderlijk plasmide en mini-plasmide

Hoge opbrengst; Resterend ouderlijk plasmide en mini-plasmide

Afbraak van ouderlijk plasmide geassocieerde verminderde opbrengst
Yaohai Bio-Pharma biedt one-stop-CDMO-oplossing voor minicirkel-DNA
Referentie:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicirkel-DNA: de toekomst voor op DNA gebaseerde vectoren? Trends Biotechnologie. 2020 okt;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

Ontvang een gratis offerte

Neem contact op