Het Hepatitis B-virus (HBV) is de oorzaak van de leverziekte die bekend staat als hepatitis B. Bovendien verspreidt het zich via lichaamsvloeistoffen zoals bloed. Volgens schattingen van de WHO komen er jaarlijks 1.5 miljoen nieuwe gevallen van chronische hepatitis B-infectie voor, met gevolgen voor 296 miljoen mensen wereldwijd. Hepatitis B is een voorbijgaande ziekte. Voor anderen kan het zich ontwikkelen tot een chronische, langdurige infectie die het risico op ernstige, zelfs fatale gezondheidsproblemen, waaronder leverkanker of ziekte, verhoogt.
Het icosahedrale, ingesloten virus dat bekend staat als volwassen HBV heeft een circulair dubbelstrengs DNA (dsDNA) genoom. Hepatitis B-oppervlakteantigeen (HBsAg), hepatitis B-kernantigeen (HBcAg) en hepatitis B-envelopantigeen (HBeAg) zijn antigenen die deel uitmaken van HBV. Er zijn drie verschillende soorten hepatitis B-virale eiwitten: klein (S), medium (M) en groot (L). HBsAg is het eerste eiwit dat wordt geïdentificeerd. Het actieve bestanddeel van recombinante vaccinaties tegen hepatitis B is recombinant HBsAg.
Het primaire structurele eiwit van het HBV-icosahedrale nucleocapside, HBcAg, is betrokken bij de reproductie van het virus. De test voor Hepatitis B-kernantilichaam (anti-HBc of HBcAb) maakt gebruik van recombinant HBcAg.
HBeAg wordt beschouwd als ‘niet-deeltjesvormig’, wordt uitgescheiden en hoopt zich op in serum. Het bevindt zich tussen de icosahedrale nucleocapsidekern en het lipidemembraan. Hetzelfde leesraam wordt gebruikt om zowel HBcAg als HBeAg te creëren.
Toepassing van HBV (HBV)-antigeen
HBsAg in HBV-vaccin
Gebaseerd op de inspanningen van Bulmberg, die het Australische antigeen ontdekte en de Nobelprijs ontving, werd in 1981 de eerste generatie HBV-vaccins goedgekeurd. Het Australische antigeen, nu hepatitis B-oppervlakteantigeen (HBsAg) genoemd, werd gevonden in de sera van geïnfecteerde mensen. patiënten en gemaakt als een uniek vaccin door directe afleiding van HBsAg uit menselijke dragers.
Het uit bloed afkomstige vaccin werd echter in 1986 vervangen door een gemodificeerd recombinant HBsAg dat werd geproduceerd met behulp van recombinant-DNA-methoden en in gistcellen uit bezorgdheid over de bioveiligheid.
Recombinante HBV-vaccins (tweede generatie) werden aanvankelijk geproduceerd met behulp van een gistsysteem. Bestaande van gist afgeleide HBV-vaccins zijn gebaseerd op de zelfassemblage van HBsAg-monomeren tot virusachtige deeltjes (VLP's). Van gezuiverd, van gist afgeleid HBsAg is gerapporteerd dat het VLP's van ~22 nm presenteert. En 60% tot 70% van de gevormde HBsAg-VLP's bestaan uit monomere HBsAg-eiwitten, terwijl de rest lipiden bevat. Samenvattend zijn de resulterende VLP's zeer immunogeen, wekken krachtige neutraliserende antilichamen op en zijn een veilig vaccin dat geen enkel viraal genoom bevat.
HBsAg bij anti-HBs-testen
Omdat het een antilichaam tegen HBsAg is, kan Anti-HBs, ook bekend als anti-HBsAb, worden getest na de vaccinatie of infectie van hepatitis B om de effectiviteit van het vaccin te evalueren of om de ziekteprogressie na HBV-infectie te volgen. Uit een “positieve” of “reactieve” anti-HBs (of HBsAb) test blijkt dat de patiënt beschermd is tegen het hepatitis B-virus. De resultaten van een positieve anti-HBs (of HBsAb) test laten zien dat de patiënt "immuun" is en beschermd is tegen infectie door het hepatitis B-virus.
De Architect Anti-HBs Assay Kit, ontwikkeld door Abbott, werd gebruikt om anti-HBs te testen die aanwezig zijn in menselijk serum en plasma en omvat recombinante HBsAg-subtypes, zowel ad als ay (geproduceerd in Escherichia coli) gecoate microdeeltjes met eiwitstabilisatoren in Tris-buffer.
HBcAg bij anti-HBs-testen
Studies hebben aangetoond dat transfusie van bloed dat positief is voor antilichamen tegen het hepatitis B-kernantigeen (anti-HBc), terwijl het negatief is voor HBsAg, bij sommige ontvangers ook leidt tot de ontwikkeling van hepatitis. Daarom kan de detectie van volbloed en componenten voor anti-HBc-middelen die zijn ontworpen voor transfusie de incidentie van transfusie-geassocieerde hepatitis B-infecties verminderen en daardoor de veiligheid van de bloedtoevoer verbeteren.
De Alinity anti-HBc-kit is ontwikkeld door Abbott en is ontworpen voor de kwalitatieve detectie van anti-HBc-antilichamen in menselijke serum- en plasmamonsters. De kit bevat recombinant HBcAg vervaardigd door E. coli. Een "positief" of "reactief" anti-HBc (of HBcAb) testresultaat toont de vroegere of huidige hepatitis B-infectie aan. In tegenstelling tot oppervlakte-antilichamen beschermen kernantilichamen niet tegen het hepatitis B-virus.
Yaohai Bio-Pharma biedt one-stop-CDMO-oplossing voor HBV-antigeen