De betekenis van stamscreening
Het screenen van geschikte gastheren is noodzakelijk voor de ontwikkeling van biologische CMC's, die de kwaliteit en consistentie van het product en het productieproces bepalen. Het directe doel van gastheerscreening is het verschaffen van een kandidaat-primaire celbank (PCB), met hoge expressieniveaus en hoge stabiliteit, zowel wat betreft passagestabiliteit als opslagstabiliteit. Het screenen van een geschikte gastheer is om twee belangrijke redenen noodzakelijk:
- Ten eerste, om de microbiële gastheer met een hoog expressieniveau te selecteren. Er zijn meerdere in de handel verkrijgbare stammen die worden gebruikt om verschillende soorten eiwitten tot expressie te brengen, zoals toxische eiwitten, oplosbare eiwitten of eukaryotische eiwitten.
- Ten tweede, om de gastheer te screenen met genetische stabiliteit. Het testen van genetische stabiliteit is een belangrijk punt gedurende de hele productielevenscyclus. Er wordt gesuggereerd dat hoge genetische stabiliteit wordt erkend als een ander sleutelkenmerk voor een geschikte soort.
Trefwoorden: selectie van microbiële stammen, screening van microbiële stammen, screening met hoge doorvoer van bacteriën of gisten, screening van hoogproductieve stammen, screening van zeer stabiele stammen, screening van genetische stabiele stammen Toepassing: humane geneeskunde, diergeneeskunde, vaccin, synthetische biologie, recombinant groot molecuul biologische, biologisch reagens
Stamscreeningsdiensten van Yaohai Bio-Pharma
Met meer dan 10 jaar CDMO-ervaring op het gebied van microbiële biologische geneesmiddelen ondersteunen we de ontwikkeling en productie van verschillende grote moleculen, waaronder recombinante subeenheidvaccins, virusachtige deeltjes (VLP), hormonen (insuline, GLP-1, groeihormoon), cytokines ( Interleukine-2/IL-2, IL-15, IL-21), groeifactoren (EGF, FGF, NGF), nanobodies/single-domain antilichamen (sdAbs), enzymen, enz.
We hebben rijke ervaringen opgedaan met de selectie van verschillende soorten plasmidevectoren en microbiële gastheren, waaronder bacteriën Escherichia coli (E. coli), en gist Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Wij kunnen het beste expressiesysteem voor uw unieke biologische geneesmiddelen vinden.
We hebben verschillende microbiële gastheren verzameld met duidelijke bronnen en standaard CoA, inclusief E. coli expressie en gistexpressie.
dienst Details
|
Diensten
|
dienst Details
|
Minimale tijdlijn/dag
|
Deliverables
|
|
Stamconstructie (E. coli)
|
Plasmidetransformatie (multi-hosts)
|
5
|
COA van commerciële hosts Stamconstructierapport
|
|
PCR-verificatie
|
|
Stamzuivering
|
|
Behoud van de stam
|
|
Stamconstructie (gist)
|
Bereiding van competente gistcellen
|
10
|
|
Linearisatie van plasmiden
|
|
Elektro-transformatie
|
|
Screening op resistentie/voedingstekorten
|
|
Stamzuivering
|
|
Behoud van de stam
|
|
Geschikte gastheerscreening
|
Plasmide- of genoom-DNA-extractie
|
15-20
|
GastheerscreeningprocesCOA van gemanipuleerde stammen
|
|
PCR-verificatie, vertering van restrictie-enzymen
|
|
Doelgensequencing
|
|
Screening van gastheren met hoge expressie
|
|
Screening van gastheren met genetische stabiliteit
|
|
Behoud van de stam
|
Casestudy
Een geschikte gastheer verbetert het eiwitexpressieniveau met 2.5 keer.
Wij hebben de opdracht om hoogproductieve producten te ontwikkelen E. coli deformatie. En we hebben drie soorten reclame geprobeerd E. coli gastheren, gebaseerd op de kenmerken van het doeleiwit. Er wordt aangetoond dat de stammen S1-1 en S1-2 (Fig A: Laan 1,2) het eiwitniveau tot 3.5 keer verbeterden dan de oorspronkelijke stam van de cliënt (Fig A: Laan 3).
Bovendien vertoonde de stam S1-1 een hoge genetische stabiliteit (Fig B) en werd erkend als kandidaatstam voor primair celbankieren (PCB).
Onze servicefuncties
Aantoonbare expertise met verschillende microbiële gastheren, bijv. E. coli DH5a, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaRoze stam 1/2/3/4; S. cerevisiae en H. polymorpha.
Wij hebben er ervaring mee E. coli periplasmatische secretie, oplosbare en inclusielichaamexpressie, evenals intracellulaire of secretie-expressie van gist. We voegen geen antibiotica toe of voegen de antibiotica toe onder wettelijke richtlijnen.
We zetten een screeningplatform met hoge doorvoer op om hoogproductieve en stabiele stammen van meer dan honderd kandidaatstammen te screenen.
Er wordt voor gezorgd dat het proces van stamengineering en screening traceerbaar is, onder het Good Data and Record Management.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
