N-glycosylatie site bezetting is een fyysiologische eigenschap van glycoproteïnen en produceert voornamelijk N-glycan. Het analyseonderzoek naar N-glycosylatie site bezetting van Yaohai Bio-Pharma wordt uitgevoerd door middel van vertering, vrijstelling, verrijking en analyse met behulp van Vloeistofchromatografie-Elektrospray Ionisatie Massaspectrometrie-Massaspectrometrie (LC-ESI-MS/MS).
Wij zijn betrokken bij de eiwitstructuur karakterisatie van verschillende grote moleculen, waaronder Recombinante Sub-eenheden Vaccins, Nanolichamen/VHHs/Single-domain Antibodies (sdAbs), Antibody Fragmenten, Hormonen/Peptiden, Cytokines, Groeifactoren (GF), Enzymen, Collagens, etc.
Reguliere Eisen voor N-glycosylatie Site Bezetting
Volgens de ICH Q6B richtlijn, "voor glycoproteïnen wordt de koolhydraatinhoud (neutrale suikers, aminosuikers en sialinezuur) bepaald. Daarnaast wordt de structuur van de koolhydraatkettingen, het oligosacharidepatroon (antennaprofiel) en de glycosylatieplaats(en) van de polypeptide keten zo goed mogelijk geanalyseerd."
Analytische Methode
| Analyse |
Methoden |
| N-glycosylatie Site Bezetting |
LC-MS na deglycosylase- en proteasevertering |
Procedures
1. Proteïnevertering van proteïnen om kleine peptidfragmenten te genereren.
2. N-glycan vrijmaking met behulp van endoglycosidase H of PNGase F. Endoglycosidase H spleten de binding tussen de twee GlcNAc-residuen in de kern van N-gekoppelde glycans, terwijl PNGase F een glycoamidas is die de binding tussen GlcNAc en Asn verbreekt, waardoor de hele suikerketting wordt vrijgelaten en Asn in Asp wordt omgezet met een massa toename van 1-Da.
3. N-glycopeptide verrijking via HILIC (Hydrofiele Interactie Vloeistofchromatografie)
4. Analyse van N-gekoppelde glycosylatieplaats bezetting met LC-ESI-MS/MS.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
