mRNA wordt breed gebruikt in het onderzoek naar gen- of proteïnefuncties. Tegelijkertijd is het algemeen in de ontwikkeling van preventieve en therapeutische biologische middelen. Als een algemene synthese strategie voor RNA-moleculen, maakt in vitro transcriptie (IVT) het mogelijk om aangepaste transcripten efficiënt te verkrijgen.
Yaohai Bio-Pharma heeft een reeks mRNA-synthese technologieën ontwikkeld om hoge-kwaliteit RNA te leveren, zoals sequentieontwerp en -optimalisatie, IVT, zuivering, lyofilisatie en lipid nanopartikel (LNP) encapsulatie. Alle producten worden uitgebracht volgens strenge kwaliteitscontrole (QC) normen.
Met de uitbraak van de COVID-19-pandemie in 2020 heeft mRNA-technologie enorme sprongen voorwaarts gemaakt, en zijn gerelateerd onderzoek en toepassingen ongekende ontwikkeling gekregen, waaronder preventieve vaccins tegen besmettelijke ziektes, therapeutische vaccins en geneesmiddelen voor oncologie, tumortherapie, eiwitvervangingstherapie, regeneratieve geneeskunde en cel- en genetherapie (CGT).
mRNA vaccin | mRNA Therapeutics |
|
Proces | Optionele Diensten | Service Details | Leveringsperiode (werkdag) | Levertbaar |
ontwerp en optimalisatie van mRNA-sequentie | Ontwerp en optimalisatie van coderende sequenties | CDS-sequentieontwerp en codonoptimalisatie | 1-3 | Sequentiebestand |
Ontwerp en optimalisatie van niet-coderende volgordes | Ontwerp en optimalisatie van UTR, polyA volgordes | |||
Transcriptie-sjabloonplasmid voorbereiding | Recombinant plasmid voorbereiding | Genesynthese | 7-10 | |
Plasmidvermenigvuldiging en -extractie | 4 | |||
Plasmidlinearisatie en -purificatie | ||||
mRNA In Vitro Transcriptie | Co-transcriptioneel capping (een-staps methode) | In vitro transcriptie (IVT) / Cap analog | 1-2 | N.v.t. |
Nucleotide wijzigingen (UTP/CTP wijzigingen) | ||||
DNA-sjabloon verwijdering (DNase I) | ||||
Enzymatische capping (tweestapsproces) | IVT | 2-3 | ||
Nucleotide wijzigingen (UTP/CTP wijzigingen) | ||||
DNA-sjabloon verwijdering (DNase I) | ||||
mRNA zuivering (lithiumchloride/magnetische deeltjes) | ||||
Enzymatische capping | ||||
mRNA Purificatie | Conventionele zuiveringsprocedure | Lithiumchloride neerslagvorming | 1 | mRNA geneesmiddelstof |
Magnetische deeltjeszuivering | ||||
Zuiveringsprocedure met chromatografiekolom | Combinatie van meerdere chromatografische methoden | 1-2 | ||
Bufferwisseling | Ultrafiltratie | 1 | ||
mRNA Lyophilisatie | Lyofilisatie | Voorbevriezing | 2-3 | mRNA lyofilisatpoeder |
Eerste droging (sublimatie) | ||||
Tweede droging (desorptie) | ||||
mRNA-Encapsulering | LNP Encapsulering | LNP Encapsulering | 2-3 | mRNA-LNPMedicijnproduct |
Concentreren en bufferwisseling | ||||
mRNA-kwaliteitsanalyse | mRNA-drugstof / gelijkvloeiend poeder | Concentratie, zuiverheid | 1 | Testrapport |
Integriteit, capping-efficiëntie, polyA-staartverdeling | 2-5 | |||
mRNA-LNP-drugproduct | Encapsulatie-efficiëntie | 1 | ||
Deeltjesgrootte en -verdeling | ||||
Oppervlakte-lading | ||||
mRNA-uitdrukkingsvalidatie | 293T-cel evaluatie | Celplating | 4 | |
Transient transfectie van cellen | ||||
Observatie van fluorescentsignaal | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Enzym-gekoppelde immunosorbent assay (ELISA) |
5' Kapje |
▪ Ongecappt ▪ Cap0, co-gecappt ▪ Cap1, co-gecappt ▪ Cap1, enzymatische capping |
5’ UTR/3’ UTR |
▪ Natuurlijke UTR sequentie ▪ Mutant\/Gemanipuleerde UTR sequentie |
3' PolyA Staart |
▪ 100A ~120A Staart (aanbevolen) ▪ Gesegmenteerde polyA staart ▪ Andere Aangepaste staarten |
Gemodificeerde nucleosiden |
▪ Ongeconstrueerde basen ▪ Pseudouridine (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosine (m5C) ▪ 5-methyluridine (m5U) ▪ 5-methoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Andere modificaties |
Geïntegreerde Serviceflow
Bied een reeks diensten aan van sequentiële ontwerpen aan de voorkant tot mRNA-bereiding, kwaliteitscontrole en expressievalidatie aan de achterkant.
Internationaal topsequenceontwerp en -optimalisatie
Professionele mRNA-sequentieontwerp en -optimalisatie ondersteunen efficiënte mRNA-uitdrukking.
Gevaryeerde nucleotidenmodificaties
Effectief verhogen van mRNA-uitdrukking en verminderen van ongunstige immuunreacties op mRNA.
Volwassen zuiveringplatform
Door een combinatie van een conventionele en zelfontworpen zuiveringsmethode te gebruiken, worden mRNA-monsters verkregen met hoge zuiverheid.
Compleet QC-platform
Verrijkte QC-opties om de eisen van routinetechnische tests te voldoen, zoals concentratie, A260/280-zuiverheid en integriteit, evenals hoge kwaliteitscontrole-eisen zoals capping-efficiëntie/polyA-verdeling.
Snelle levering
Op maat gemaakte mRNA kan binnen 7 dagen worden geleverd, met uitzondering van externe sequentie-synthese.