De producten verkregen door in vitro cyclisatie en RNase R verrijking moeten verder worden ontdaan van in vitro transscriptie (IVT), inclusief onverbruikte substraten in de cyclisatie-reactie, reactiebijproducten en gedeeltelijk gespleten RNA.
Yaohai Bio-Pharma beschikt over volwassen LiCl-neerslag, magneetdeelpartikelzuivering, zelfontwikkelde zuiveringsmethoden en andere gevarieerde zuiveringsoplossingen om effectief verschillende verstervingen te verwijderen en hoogzuivere circRNA voor te bereiden.
Zuiveringsoplossing voor kleine hoeveelheden circRNA voor celtransfectie en als onderdeel van dierexperimenten.
Zuiveringsoplossing voor kleine hoeveelheden circRNA voor celtransfectie en als onderdeel van dierexperimenten.
Toepassingscenario's met hogere kwaliteit;
Stabiel en schaalbaar zuiveringsproces om GMP-productievereisten te voldoen.
Proces | Optionele Diensten | Service Details | Leveringstermijn (dagen) | Leveranties |
circRNAzuivering | Conventionele reinigingsoplossing | Lithiumchloride neerslagvorming | 1 | circRNA medicijnstof |
Magnetische deeltjeszuivering | ||||
Uiterst pure circRNA-ziivering | Preparatieve hoogprestatie vloeistofchromatografie (HPLC) | 1-2 | ||
Bufferwisseling | Ultrafiltratie | 1 | ||
circRNA kwaliteitscontrole | Concentreren / zuiveren | Ultraviolet (UV) Spectrofotometrie | 0.5 | Testrapport |
Zuiverheid | Agarose Gel Electrophorese (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - optioneel | 1 |
Toepassings scenario's kunnen worden bereikt.
circRNA met een zuiverheid van meer dan 90%;
Door strikte controle van RNases in het experimentele milieu en de verbruiksartikelen wordt effectief voorkomen dat RNA afbreekt.
Yaohai Bio-Pharma heeft een volwassen circRNA-purificatieoplossing ontwikkeld die verschillende procesgerelateerde impureheden effectief kan verwijderen.
De door conventionele methoden gepurificeerde circulaire RNA-producten zijn nog steeds duidelijk gemengd met gecrashte RNA en intronen.
Na de purificatieoplossing ontwikkeld door Yaohai Bio-Pharma kunnen verschillende lineaire RNA-impureheden, zoals gecrashte RNA en intronen, succesvol worden verwijderd.
validatie van circRNA-uitdrukking
Met behulp van een conventionele liposoom wordt gezuiverde eGFP circRNA getransfereerd in 293T-cellen, en na 24 uur wordt er een fluorescentsignaal waargenomen dat na 48 uur blijft toenemen. Het fluorescentsignaal is nog steeds te detecteren op de 7e en 14e dag na transfectie.