Alle categorieën
Tag-vrije eiwitbereiding

Tag-vrije eiwitbereiding

Home >  Microbiële CDMO  >  Onderzoek en ontdekking  >  Tag-vrije eiwitbereiding

Tag-vrije eiwitbereiding

Eiwittags, als fusiepartners die worden gebruikt in recombinant-DNA-technologieën, maken effectieve, eenstaps-affiniteitszuivering mogelijk voor verschillende eiwitten/peptiden met verschillende kenmerken. Ondanks dit belangrijke voordeel kunnen tags als exogene aminozuren de eiwitstructuur en biologische functies veranderen. Daarom hebben niet-gelabelde (tag-vrije) eiwitten of peptiden meer de voorkeur om de veiligheid en werkzaamheid te garanderen, vooral op biofarmaceutisch gebied. Een recombinant eiwit met een fusietag heeft beperkte mogelijkheden voor het verkrijgen van autorisatie van medische/geneesmiddelentoedieningsinstanties.

Gebaseerd op het R&D-platform voor microbiële biologische geneesmiddelen, biedt Yaohai Bio-Pharma op maat gemaakte, niet-gelabelde (Tag-vrije) eiwitbereidingsdiensten die zijn gericht op het voldoen aan unieke doelstellingen voor onderzoek, ontwikkeling en productie voor klinisch gebruik.

Trefwoorden: tag-vrije eiwitproductie, niet-getagde eiwitzuivering, gratis tag-gebaseerde eiwitbereiding, tagloze eiwitexpressie en -zuivering, zeer tag-vrij doeleiwit 

Toepassing: onderzoek naar menselijke geneeskunde, ontwikkeling van diergeneeskunde, ontwikkeling van recombinante vaccins, productie van recombinante biologische geneesmiddelen met grote moleculen

Ons microbiële R&D-platform

We hebben ervaring met microbiële stamtechniek, fermentatie en productzuivering.

bacteriën: Escherichia coli (E. coli)

Gist: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Aangepaste opties
Modaliteit Recombinant eiwit
Startmaterialen Gensequenties, recombinant plasmide of gemanipuleerde stammen
Deliverables Zuiveren: >80%, >85%, >90% Hoeveelheid: 0.2~10 g (te bepalen door het project)
Expressiesysteem en formatie

E. coli periplasmatische secretie, oplosbare en inclusielichaamexpressie;

Intracellulaire of secretie-expressie van gist

Analyse methoden Ultraviolet (UV), bicinchoninezuurtest (BCA), Bradford of Lowry voor kwantiteit
Natriumdodecylsulfaatpolyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE) voor zuiveringstests
Optioneel: Western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), hoge prestatie vloeistofchromatografie (HPLC)
Resterende onzuiverheden Endotoxine (optioneel)
dienst Details

Diensten

dienst Details

Minimale tijdlijn (werkdag)

Gen synthese

Codonoptimalisatie voor specifieke expressiehost

7 ~ 10 dagen

Gen synthese

Plasmide/vectorconstructie

Klonering in plasmide/vector

2 dagen

Plasmide-transformatie

Verificatie van de polymerasekettingreactie (PCR), vertering van restrictie-enzymen, gensequencing

3 dagen

Eiwitexpressie in E. coli

Plasmide-transformatie,

2 dagen

Teelt in schudfles

3 dagen

Gisting in 7 liter, optimalisatie

4 dagen/batch

Tag-vrije eiwitzuivering, optimalisatie

5 ~ 10 dagen / batch

Testen door natriumdodecylsulfaatpolyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE)

Eiwitexpressie in gist

Preparaat van gistcompetente cellen

4 dagen

Plasmidelinearisatie en elektrotransformatie

Gisting in 7 liter, optimalisatie

5 dagen

Tag-vrije eiwitzuivering, optimalisatie

7 dagen/batch

Tag-vrije eiwitzuivering

5 ~ 10 dagen / batch

QC door SDS-PAGE

Aanvullende services (optioneel)
Ontvang een gratis offerte

Neem contact op