Biologische werkzame stoffen zijn complexe grote moleculen, bijzonder gevoelig voor milieuinvloeden: temperatuur, oxidatie, licht, ionische inhoud en schering. Het is cruciaal om stabiliteitsstudies uit te voeren op de werkzame stof en het geneesmiddel onder bedoelde opslagcondities, versnelde condities en gedwongen degradatiecondities. De stabiliteitsgegevens worden meestal gebruikt om de houdbaarheid, vervaldatum en opslagcondities te ondersteunen.
Volgens de ICH Q5C richtlijn biedt Yaohai Bio-Pharma stabiliteitsstudiediensten aan voor eiwitten, peptiden, plasmiden en mRNA's, met inbegrip van langdurige stabiliteitsstudies, versnelde stabiliteitsstudies en gedwongen degradatiestudies. Daarnaast beschikken we over alle noodzakelijke mogelijkheden voor monsterslag en analyse van Kritieke Kwaliteitskenmerken (CQA) om stabiliteitsgegevens te verzamelen.
Regelgevende eisen voor stabiliteitsstudies
Volgens de ICH Q5C-richtlijn, "De juiste ondersteunende stabiliteitsgegevens moeten worden ontwikkeld voor biotechnologische/biologische producten, omdat veel externe omstandigheden de werkzaamheid, reinheid en kwaliteit van het product kunnen beïnvloeden. Het wordt ook sterk aangeraden dat studies worden uitgevoerd op het geneesmiddel en het eindproduct onder versneld en stressvolle omstandigheden."
Real-time (langdurige) stabiliteitsstudies
Bij real-time (langdurige) stabiliteitstesting wordt het actieve stof of het geneesmiddel opgeslagen onder de bedoelde opslagomstandigheden en gecontroleerd tot de biologische kenmerken veranderen buiten de aanvaardbare limieten. Uit langdurige stabiliteitsstudies kan de houdbaarheid, vervaldatum, opslagomstandigheden en steekproef-/testintervallen worden vastgesteld.
Tabel 1. De testfrequentie in langdurige stabiliteitsstudies van pre-approvabiologica
| Houdbaarheid |
Testintervallen |
Tijdpunten |
| 1 jaar of minder |
Maandelijks voor de eerste 3 maanden;
Elke 3 maanden daarna
|
Op 0, 1, 2, 3, 6, 9 en 12 maanden |
| Langer dan 1 jaar |
Elke 3 maanden in het eerste jaar;
Elke 6 maanden in het tweede jaar;
Jaarlijks daarna
|
Bij 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 maanden en jaarlijks daarna |
Versneld stabiliteitsonderzoek
De aanbevolen opslagtemperatuur van injecteerbare biopharmaceutische producten ligt meestal tussen 2 en 8℃. Versneld stabiliteitsonderzoek wordt uitgevoerd met een kortere duur onder versnelde omstandigheden, zoals hoge temperaturen. De stabiliteitsgegevens worden beschouwd als ondersteunende informatie voor de productstabiliteit en worden breed gebruikt bij het bepalen van de houdbaarheid en vervaldatum, evenals bij de formuladevelopments.
Tabel 2. Voorbeelden van versneld stabiliteitsonderzoek
| Stabiliteits Studies |
Versnelde omstandigheden |
monsterpunt |
| Versneld stabiliteitsonderzoek |
verhoogde temperatuur
relatieve luchtvochtigheid
|
Bij 0, 1, 2, 3, 6 maanden |
Geforceerde Degradatie Studies
Het doel van geforceerde degradatie studies is om stabiliteitsinformatie te verzamelen onder stressomstandigheden, zoals hoge temperaturen, vochtigheid, licht, oxidatie, vries-dooicyclus of mechanische stress (schudden, schering). Geforceerde degradatie studies van het geneesmiddel onder extreme voorwaarden kunnen helpen bij het herkennen van sleutelfactoren/parameters die leiden tot degradatie van biologische producten. Deze gegevens zijn nuttig voor een robuustheidsbeoordeling van de formulering en productieproces.
Tabel 3. Voorbeelden van Geforceerde Degradatie Studies
| Spanning |
Stressvoorwaarden |
Duur |
| Temperatuur |
Hoge temperatuur (bijv., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Dagen-maanden |
| Vochtigheid |
Relatieve vochtigheid (0~100%) |
Dagen-maanden |
| Licht |
Minimaal 1,2 miljoen lx h en 200 W h/m2 |
Meerdere dagen |
| Invriezen-dooien |
invriezen–dooien (van -20℃, -80℃ naar 15℃) |
1~5 cycli |
| Schudden, roeren |
50~500 toeren per minuut |
Uren-dagen |
Analytische methoden die stabiliteitsstudies ondersteunen
| Critische Kwaliteitskenmerken (CQAs) |
Analytische methoden |
| Totaal eiwitgehalte |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Zichtbare deeltjes |
Visuele controle |
| Aggregatie, fragmenten |
Dynamische lichtsverspreiding Groottescheidingscromatografie (SEC) HPLC/UPLC, Capillaire elektroforese CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Non-reducerende SDS-PAGE |
| Peptidenkaarting en sequencering |
LC-MS/MS |
| Disulfidebindingen |
LC-MS/MS |
| PTM (oxidatie, isomerisatie, deamidatie, glycosylatie) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
