De betekenis van stremscreening
Het screenen van geschikte hosts is noodzakelijk voor de CMC-ontwikkeling van biologische geneesmiddelen, wat de kwaliteit en consistentie van het product en het productieproces bepaalt. Het directe doel van hostscreening is om een kandidaat primaire celbank (PCB) te leveren met hoge expressieniveaus en hoge stabiliteit, zowel in termen van passages als opslagstabiliteit. Het screenen van geschikte hosts is nodig om twee hoofden redenen:
- Ten eerste, om de microbiele host met een hoge expressieniveau te selecteren. Er zijn meerdere commerciële stammen beschikbaar die worden gebruikt om verschillende soorten eiwitten uit te drukken, zoals toxische eiwitten, oplosbare eiwitten of eukaryotische eiwitten.
- Ten tweede, om de gastheer te testen op genetische stabiliteit. Het testen op genetische stabiliteit is een belangrijk punt gedurende de hele productieleven cyclus. Het wordt voorgesteld dat hoge genetische stabiliteit wordt beschouwd als een andere belangrijke kenmerk voor een geschikte stam.
Sleutelwoorden: selectie van microbiele stammen, scherming van microbiele stammen, high-throughput scherming van bacteriën of gist, scherming van hoogproducerende stammen, scherming van hoogstabiele stammen, scherming van genetisch stabiele stammen Toepassing: humane geneeskunde, diergeneeskunde, vaccins, synthetische biologie, recombinante grote moleculenbiologica, biologische reagens
Stam Screening Services van Yaohai Bio-Pharma
Profiterend van meer dan 10 jaar ervaring in CDMO voor microbiele biologische producten, ondersteunen wij de ontwikkeling en productie van verschillende grote moleculen, waaronder recombinante subeenheid vaccins, virusachtige deeltjes (VLP), hormonen (insuline, GLP-1, groeihormoon), cytokines (Interleukine-2/IL-2, IL-15, IL-21), groeifactoren (EGF, FGF, NGF), nanolichamen/Single-domain antilichamen (sdAbs), enzymen, etc.
We hebben rijke ervaring opgedaan in de selectie van verschillende soorten plasmidvectoren en microbiele gastheren, waaronder bacteriën Escherichia coli (E. coli), en gist Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). We kunnen het beste expressiesysteem vinden voor uw unieke biologische producten.
We hebben verschillende microbiele gastheren verzameld met duidelijke bronnen en een gestandaardiseerde CoA, waaronder E.Coli bacteriële expressie en gistexpressie.
Service Details
|
Diensten
|
Service Details
|
Minimale tijdslijn/dag
|
Leveranties
|
|
Strofenconstructie (E. coli)
|
Plasmidtransformatie (meerdere gastheren)
|
5
|
COA van commerciële gastheren Strofenconstructierapport
|
|
PCR-verificatie
|
|
Strofenpurificatie
|
|
Strofenvoortplanting
|
|
Strofenconstructie (gist)
|
Voorbereiding van competent gistcellen
|
10
|
|
Plasmidlineariseren
|
|
Elektrotransformatie
|
|
Resistentie\/Voedingstekort screening
|
|
Strofenpurificatie
|
|
Strofenvoortplanting
|
|
Geschikte host screening
|
Plasmid of Genoom DNA-extractie
|
15-20
|
Host screening proces COA van gegenereerde stammen
|
|
PCR-verificatie, restrictie enzym digestie
|
|
Doelwitgen Sequencing
|
|
Screening van hosts met hoge expressie
|
|
Screening van hosts met genetische stabiliteit
|
|
Strofenvoortplanting
|
Gevalstudie
Een geschikte host verbetert het eiwitraceniveau met 2,5 keer.
We zijn opgedragen om hoogproducerende E. coli stammen te ontwikkelen. En we hebben drie soorten commerciële E. coli gastheren getest, gebaseerd op de eigenschappen van het doel eiwit. Het bleek dat de stammen S1-1 en S1-2 (Fig A: Baan 1,2) het eiwitniveau verbeterden tot 3,5 keer zoveel vergeleken met de initiële stam van de klant (Fig A: Baan 3).
Daarnaast toonde de stam S1-1 een hoge genetische stabiliteit (Fig B), en deze werd erkend als kandidaatstam voor de primaire celbank (PCB).
Onze Service Kenmerken
Gedemonstreerde expertise met verschillende microbiele gastheren, b.v., E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink stam 1/2/3/4; S. cerevisiae en H. polymorpha .
We hebben ervaring met E. coli periplastische secretie, oplosbare expressie en inclusiebody-expressie, evenals intracellulaire of secrete expressie bij gist. We voegen geen antibiotica toe of voegen antibiotica toe onder reguleringsrichtlijnen.
We ontwikkelen een high-throughput screeningplatform om uit meer dan honderd kandidaatstammen hoge productiestammen en stabiele stammen te selecteren.
Het is verzekerd dat het proces van stamontwikkeling en screening traaceerbaar is, in overeenstemming met de Goede Gegevens- en Registratiebeheerspraktijken.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
