Circulaire mRNA (circRNA) wordt breed toegepast in het onderzoek naar gen- of eiwitfuncties. Tegelijkertijd is het populair in de ontwikkeling van preventieve en therapeutische biologica, vergelijkbaar met mRNA.
Yaohai Bio-Pharma heeft een reeks circRNA-synthese technologieën ontwikkeld om hoge-kwaliteit RNA te leveren, zoals sequentiële ontwerp en optimalisatie, in vitro transcripcie (IVT), circularisatie/cyclisatie, zuivering en encapsulatie in lipid nanopartikels (LNP). Alle producten worden vrijgegeven onder strenge kwaliteitscontrole (QC) normen.
In vergelijking met lineaire mRNA is circulaire RNA (circRNA) structureel stabielere en een belangrijk onderzoeksgebied in de huidige nucleïnezuurgeneesmiddelen. Het heeft een breed scala aan toepassingen in verschillende velden, ofwel als coderende circRNA of niet-coderende circRNA, inclusief preventieve vaccins voor infectieuze ziekten, therapeutische oncologievaccins, therapeutische oncologiemedicijnen, eiwitvervangingstherapie, regeneratieve geneeskunde, cel- en genetherapie (CGT), moleculaire sponsfunctie en RNA aptamer.
Proces | Optionele Diensten | Service Details | Leveringstermijn (dagen) |
ontwerp en optimalisatie van circRNA-sequentie | Ontwerp en optimalisatie van coderende sequenties | CDS Codon Optimalisatie | 1 |
Ontwerp en optimalisatie van niet-coderende volgordes | Intron en Exon Sequentie, Homoloog Arm en Spacer Ontwerp en Optimalisatie | 1-2 | |
Circular Plasmid Bereiding | Genesynthese | Gene Synthese (Derdenpartij) | 7-10 |
Plasmidvermenigvuldiging | Plasmidvermenigvuldiging | 2 | |
Plasmidextractie | |||
Linearisatie van plasmidpreparaten | Plasmidlinearisatie en -purificatie | Plasmidlineariseren | 1 |
DNA-linearisatiezuivering | |||
In Vitro Transcriptie en Cyclisatie | In Vitro Transcriptie en Cyclisatie | In Vitro Transcriptie- en Cyclisatierecties | 1-2 |
RNase R Digestie | |||
Optimalisatie - optioneel | Reactiecompositie, Tijdsoptimalisatie | 2-5 | |
circRNA Purificatie | Conventionele zuiveringsmethode | Lithiumchloride neerslagvorming | 1 |
Magnetische deeltjeszuivering | 1 | ||
Uiterst pure circRNA-ziivering | Voorbereidende Hoogprestatievloeistofchromatografie (HPLC) | 1-2 | |
Bufferwisseling | Ultrafiltratie | 1 | |
circRNA Lyofilisatie | monsterinvulling | Volledig | 2-3 |
Lyofilisatie | Voorbevriezing | ||
Eerste droging (sublimatie) | |||
Tweede droging (desorptie) | |||
circRNA-LNP Encapsulering | LNP Encapsulering | Materiaal- en vloeistofvoorbehandeling | 2 |
Microfluidic Device Mengen | |||
Bufferwisseling | Tangentieel stroomfiltering | 1 | |
Steriliseren | Filtratie | ||
Kwaliteitscontrole van plasmid-DNA | Concentratie/pureheid | Ultraviolet (UV) Spectrofotometrie | 1-2 |
Plasmidconformatie | Agarose Gel Electrophorese (AGE) | ||
Capillaire Electrophorese (CE) - Optioneel | |||
Plasmid identificeren | Restrictie enzym identificatie/AGE | ||
Kwaliteitscontrole van circRNA | Concentratie/pureheid | Ultraviolet (UV) Spectrofotometrie | - |
Zuiverheid | Agarose Gel Electrophorese (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC - optioneel | 1 | ||
Kwaliteitscontrole van circRNA-LNP | Encapsulatie-efficiëntie | RiboGreen-methode | 1 |
Deeltjesgrootte | Dynamische Lichtschatting (DLS) | 1 | |
Polydispersiteitsindex | Dynamische Lichtschatting (DLS) | 1 | |
Zetapotentiaal | Dynamische Lichtschatting (DLS) | 1 | |
Celgebaseerde Potentieassay | Celtransfectie | Celplating, celtransfectie | 4 |
Detectie van doel eiwit | Fluorescentieobservatie, Western Blot/ELISA | 1-3 |
We hebben enhanced green fluorescent protein circRNA (eGFP circRNA), mCherry circRNA, luciferase circRNA getransfereerd in 293T cellen en het doeleiwit gedetecteerd via fluorescerende, lichtgevende of kleursignalen, western blot (WB), enzym-gekoppelde immunosorbent assay (ELISA).
Celgebaseerde Potentieassays van circRNA monsters door Yaohai Bio-Pharma