Plasmid DNA, als in vitro transcriptie (IVT) sjabloon, is een belangrijke grondstof voor de productie van mRNA. Een hoge opbrengst, hoge zuiverheid en hoge herstelgraad van plasmid DNA zijn de belangrijkste doelstelling tijdens de ontwikkeling van het plasmidproces.
Yaohai Bio-Pharma biedt een volledige oplossing voor plasmidontwikkeling, inclusief upstream (fermentatie), downstream (zuivering) procesontwikkeling, proceskenmerken en procesvalidatie. We hebben uitgebreide ervaring met het verbeteren van de opbrengst van plasmiden en het isoleren ervan uit complexe matrices door fermentatie-, zuiverings- en stoorstofverwijderingsprocessen te ontwikkelen en te optimaliseren.
De basisbioproces voor plasmidproductie omvat: Escherichia coli (E. coli) fermentatie, celharvesting en alkalische lyse, verduidelijking, concentratie, drie-staps chromatografisch proces (opvang, tussenzuivering en polijsten), en concentratie.
Service Details | Eenheidsoperaties | Parameters |
E. coli fermentatie |
Schuddend flesje | Medium samenstellingen, antibiotica, inokulumvolume, groeitemperatuur, enz. |
Fermenter (7 L) |
Antibiotica, inokulumvolume, groeitemperatuur, pH, opgeloste zuurstof (DO), voedingsmodus (bijv., fed-batch), voedingsmedium, fermentatietijd, enz. |
|
Celharvesting | Microfiltratie | Standaard E. coli harvestproces |
Cellyse | Celheropname, alkalische lyse, neutralisatie | Alkali verhouding, lysetijd |
Verduidelijking | Filtratie | Ruwe filtratie, 20 µm en een 5 µm filtertrain (voorkeur) |
Concentratie | Ultrafiltratie, tangentiële stromingsfiltratie | Poriegrootte (of NMWC), Transmembranedruk (TMP), Flux, verhouding van filtraatvolume tot membranoppervlak |
Driestaps chromatografie | Grootschalige chromatografie (SEC), of gel filtratie chromatografie (GFC) | Kolomlengte en -diameter, buffer samenstelling, injectievolume, mobiele fase samenstelling (adsorptie en desorptie), pH, vloedsnelheid, evenwicht, binding, wassen en elueringscondities. |
Affiniteitschromatografie (AF) | ||
Anionenuitwisselingschromatografie (AEX) | ||
Concentratie | Ultrafiltratie, tangentiële stromingsfiltratie | Poriegrootte (of NMWC), Transmembranedruk (TMP), Flux, verhouding van filtraatvolume tot membranoppervlak |
Meer oplossingen voor het zuiveringsproces van biologische middelen |