Hepatitis C is een leverziekte die wordt veroorzaakt door het hepatitis C-virus (HCV), dat wordt overgedragen via het bloed van een geïnfecteerde persoon. Wereldwijd zijn naar schatting 58 miljoen mensen besmet met het hepatitis C-virus, met jaarlijks ongeveer 1.5 miljoen nieuwe patiënten. Chronische hepatitis C infecteert naar schatting 3.2 miljoen jonge mensen en kan zowel acute als chronische hepatitis veroorzaken, waaronder een milde ziekte en een ernstige, levenslange ziekte zoals levercirrose en kanker (hepatocellulair carcinoom en lymfomen). Anders dan bij hepatitis A en B bestaat er momenteel geen vaccin tegen het hepatitis C-virus.
Omdat het een klein, omhuld, positief-sense enkelstrengs RNA (ssRNA)-virus is dat behoort tot de familie Flaviviridae, omvat het hepatitis C-virusdeeltje een lipide-membraan-envelop met een diameter van 55 tot 65 nm.
Het genoom van HCV bestaat uit een open enkel leesframe waarvan de lengte 9600 nucleotidebasen bedraagt; de structurele eiwitten van HCV zijn het kerneiwit, envelopeiwitten E1 en E2, en de niet-structurele eiwitten bevatten NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A en NS5B. De eiwitten van het virus worden in de volgende volgorde langs het genoom beheerd: N-terminaal-kernantigeen (HCVcAg)-E1–E2–p7-NS2–NS3–NS4A–NS4B–NS5A–NS5B–C-terminal.
HCV-kernantigeen (HCVcAg)
Omdat het een structureel fosfoproteïne van het HCV-capside is, bestaat het HCV-kernantigeen (HCVcAg) uit de eerste 191 aminozuren van het virale polyproteïne. Het kernantigeen van het Hepatitis C-virus is in hoge mate bewaard gebleven bij alle HCV-genotypes. Ze zijn overal in het virus aanwezig en in RNA-vrije kerneiwitconstructen.
Envelopeiwitten (E1 en E2)
E1 en E2 zijn twee virale envelopglycoproteïnen ingebed in de lipide-envelop. Beiden zijn verantwoordelijk voor virale hechting en celinvoer. Binnen de envelop bevindt zich een icosaëdrische kern met een diameter van 33-40 nm.
Niet-structurele eiwitten
Als een membraanomspannend eiwit van 63 aminozuren speelt NS1 (p7)-eiwit een belangrijke rol bij de virusmorfogenese. NS2 is een transmembraaneiwit met proteaseactiviteit en NS3 is een eiwit van 67 kDa met serineproteaseactiviteit aan het N-uiteinde en vormt een heterodimeer complex met NS4A, dat dient als een proteïnasecofactor. NS4B is essentieel voor de rekrutering van andere virale eiwitten. NS5A is als hydrofiel fosfoproteïne cruciaal voor virale replicatie, modulatie van celsignaleringsroutes en de interferonrespons. Het NS5B-eiwit is RNA-afhankelijk RNA-polymerase.
Toepassing van HCV-antigenen
Er zijn HCV-antigenen die kunnen worden toegepast in anti-HCV-antilichaamtests voor het detecteren van antilichamen tegen HCV in bloed. Door middel van een serologische test op anti-HCV-antilichamen worden patiënten geïdentificeerd die met het virus zijn geïnfecteerd. De anti-HCV-test is ontworpen om menselijke donoren, zoals vrijwillige donoren van volbloed en bloedbestanddelen, en andere levende donoren, op de aanwezigheid van anti-HCV te detecteren.
PRISM HCV-reagenskit
De ABBOTT PRISM HCV-test wordt gebruikt voor kwalitatieve detectie van antilichamen tegen het Hepatitis C-virus (anti-HCV) in menselijke serum- en plasmamonsters. Het betreft een in vitro chemiluminescente immunoassay (ChLIA). De kit bevat recombinante antigenen, waaronder kerneiwitten en niet-structurele eiwitten (NS3, NS4 en NS5), en kan daarom worden toegepast om antilichamen tegen deze antigenen te detecteren.
Het HCr43-eiwit is een fusie-eiwit dat bestaat uit het HCV-kerneiwit en het niet-structurele HCV-gebied 3 (NS3), tot expressie gebracht in Escherichia coli (E. coli).
Het c100-3-eiwit wordt tot expressie gebracht in Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) als een fusie-eiwit van NS3, NS4 en superoxide-dismutase (SOD).
Het NS5-SOD-fusie-eiwit wordt ook tot expressie gebracht in Saccharomyces cerevisiae.
Anti-HCV-reagenskit van Alinity
Als een andere kit voor anti-HCV-testen op het Alinity-systeem bestaat de Anti-HCV-assay van Alinity uit recombinante, van HCV afkomstige antigenen (c100-3, HCr43) vervaardigd in E. coli en gist. De Anti-HCV-test van Alinity is bedoeld voor het detecteren van antilichamen tegen de kerneiwit-, NS3- en NS4-regio's van het HCV-genoom.
Yaohai Bio-Pharma biedt one-stop-CDMO-oplossing voor HCV-antigeen