Enzymatisch reagens

Modaliteit

Proteasen voor het verwijderen van tags

Om de oplosbaarheid te verbeteren en het zuiveringsproces van recombinante eiwitten te vereenvoudigen, voegen onderzoekers gewoonlijk fusietags toe, waarvan vaak His-tag, maltose-bindend eiwit (MBP) en glutathion-S-transferase (GST) worden gebruikt.

Hoewel het wordt gemerkt als een extra eiwitsequentie, moet het worden verwijderd om de biologische activiteit in de farmaceutische industrie te behouden. Voor het verwijderen van fusietags zijn plaatsspecifieke proteasen nodig, zoals enterokinase (EK), trombine, tabaksetsvirusprotease (TEVp), menselijk rhinovirusprotease 3C (HRV3C), klein ubiquitine-modificerend eiwit (SUMO)-protease, tabaksadervlekkenvirus ( TVMV)-protease en carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).

Type	Enzym	Erkenningssite
Endoproteasen voor het verwijderen van tags	Enterokinase (EK), Enteropeptidase	DDDDK↓
	trombine	LVPR↓GS
	TEV-protease	ENLYFQ↓G
	HRV3C-protease	LEVLFQ↓GP
	SUMO-protease	SUMO tertiaire structuur
	TVMV-protease	ETVRFQG↓S
Exoproteasen voor het verwijderen van tags	Carboxypeptidase A (CPA)	C-terminale aminozuren, behalve Pro, Lys en Arg
Exoproteasen voor het verwijderen van tags	Carboxypeptidase B (CPB)	C-terminale Lys en Arg

Andere proteasen

Aanvraag	Enzym	Functie
Andere proteasen	Protease K	Een serineprotease dat eiwitten verteert door peptidebindingen te hydrolyseren.
	IdeS, IgG-protease	IgG-afbrekende enzymen (Ides) die splitsen op een specifieke plaats van immunoglobuline G (IgG), waardoor Fab- en Fc-fragmenten worden gegenereerd
	IgA1-protease	Een proteolytisch enzym dat een specifieke plaats in de scharnierregiosequentie van humaan immunoglobuline A1 (IgA1) splitst.

nuclease

Aanvraag	Enzym	Functie
nuclease	nuclease	Splitst nucleïnezuren (DNA of RNA) door de fosfodiësterbindingen te hydrolyseren.
nuclease	Enzym beperken	Een endonuclease dat DNA op of nabij specifieke plaatsen splitst.

Amidase

Aanvraag	Enzym	Functie
Amidase	PNGase F	Splitst tussen de binnenste GlcNAc- en asparagineresiduen van hoge mannose-, hybride- en complexe oligosachariden.

Alle categorieën

Enzymatisch reagens

Modaliteit