Proteasen voor het verwijderen van tags
Om de oplosbaarheid te verbeteren en het zuiveringsproces van recombinante eiwitten te vereenvoudigen, voegen onderzoekers gewoonlijk fusietags toe, waarvan vaak His-tag, maltose-bindend eiwit (MBP) en glutathion-S-transferase (GST) worden gebruikt.
Hoewel het wordt gemerkt als een extra eiwitsequentie, moet het worden verwijderd om de biologische activiteit in de farmaceutische industrie te behouden. Voor het verwijderen van fusietags zijn plaatsspecifieke proteasen nodig, zoals enterokinase (EK), trombine, tabaksetsvirusprotease (TEVp), menselijk rhinovirusprotease 3C (HRV3C), klein ubiquitine-modificerend eiwit (SUMO)-protease, tabaksadervlekkenvirus ( TVMV)-protease en carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).
|
Type
|
Enzym
|
Erkenningssite
|
|
Endoproteasen voor het verwijderen van tags
|
Enterokinase (EK), Enteropeptidase
|
DDDDK↓
|
|
trombine
|
LVPR↓GS
|
|
TEV-protease
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C-protease
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO-protease
|
SUMO tertiaire structuur
|
|
TVMV-protease
|
ETVRFQG↓S
|
|
Exoproteasen voor het verwijderen van tags
|
Carboxypeptidase A (CPA)
|
C-terminale aminozuren, behalve Pro, Lys en Arg
|
|
Carboxypeptidase B (CPB)
|
C-terminale Lys en Arg
|
Andere proteasen
|
Aanvraag
|
Enzym
|
Functie
|
|
Andere proteasen
|
Protease K
|
Een serineprotease dat eiwitten verteert door peptidebindingen te hydrolyseren.
|
|
IdeS, IgG-protease
|
IgG-afbrekende enzymen (Ides) die splitsen op een specifieke plaats van immunoglobuline G (IgG), waardoor Fab- en Fc-fragmenten worden gegenereerd
|
|
IgA1-protease
|
Een proteolytisch enzym dat een specifieke plaats in de scharnierregiosequentie van humaan immunoglobuline A1 (IgA1) splitst.
|
nuclease
|
Aanvraag
|
Enzym
|
Functie
|
|
nuclease
|
nuclease
|
Splitst nucleïnezuren (DNA of RNA) door de fosfodiësterbindingen te hydrolyseren.
|
|
Enzym beperken
|
Een endonuclease dat DNA op of nabij specifieke plaatsen splitst.
|
Amidase
|
Aanvraag
|
Enzym
|
Functie
|
|
Amidase
|
PNGase F
|
Splitst tussen de binnenste GlcNAc- en asparagineresiduen van hoge mannose-, hybride- en complexe oligosachariden.
|
Yaohai Bio-Pharma biedt one-stop-CDMO-oplossing voor enzymatisch reagens
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
