Belangrijke enzymen voor lange-RNA-productie
mRNA, als een type lange coderende RNA, werkte veilig en efficiënt bij een bredere groep mensen tijdens de COVID-19-pandemie. Andere lange coderende RNAs, zoals zelf-vermenigvuldigende RNA (saRNA) en circulaire mRNA (circRNA), toonden ook efficiëntie in preclinische en klinische studies.
Grote schaalproductie van lange-coderende RNA berust op in vitro transcriptie (IVT) door verschillende enzymatische reacties. De stappen van RNA-productie omvatten het voorbereiden van sjabloon-DNA, IVT-RNA-synthese, circulatie, DNA-verwijdering, RNA-modificatie (capping en tailing), en RNA-purificatie.
Er zijn verschillende belangrijke enzymen die worden gebruikt in de productie van lange coderende RNA (bijvoorbeeld mRNA, saRNA en circRNA), waaronder restrictie-endonucleasen, T7 RNA-polymerase (T7 RNAP), RNase-inhibitor, inorganisch pyrofosfatase, DNase I, vaccinia capping enzyme en RNase R.
|
Proces
|
Enzym
|
Functie
|
|
Voorbereiding van sjabloon-DNA
|
Restrictie-endonucleasen
|
Lineariseren van plasmidisch DNA (pDNA) om het genereren van een langere transcript te voorkomen.
|
|
IVT RNA synthese
|
T7 RNA polymerase (T7 RNAP)
|
Bind aan de T7 promoter en genereer specifieke RNA-transcript; Spelen een sleutelrol tijdens de IVT-reactie.
|
|
RNase-inhibitor, recombinant
|
Inhiberen van RNase-activiteit tijdens de IVT-reactie.
|
|
Pirifosfaatase, anorganisch (iPPase)
|
Voorkomen van pirifosfaat tijdens de IVT-reactie.
|
|
DNA verwijdering
|
DNase I
|
Verwijder het DNA-sjabloon.
|
|
RNA-wijziging
|
Vaccinia capping enzyme
|
Voeg Cap1-structuren toe aan de 5′ einden van IVT mRNA.
|
|
2’-O-Methyltransferase
|
| circRNA verrijking |
Rnase R |
Spreek lineair RNA af en verrijk circulair RNA. |
Yaohai Bio-Pharma biedt een volledige CDMO-oplossing voor enzymen
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
