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Préparation de protéines sans étiquette

Préparation de protéines sans étiquette

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Préparation de protéines sans étiquette

Les étiquettes protéiques, utilisées comme partenaires de fusion dans les technologies d'ADN recombinant, permettent une purification par affinité en une seule étape efficace pour diverses protéines/peptides ayant différentes caractéristiques. Malgré cet avantage important, les étiquettes, en tant qu'acides aminés exogènes, peuvent altérer la structure des protéines et leurs fonctions biologiques. Par conséquent, les protéines ou peptides sans étiquette (tag-free) sont préférés pour garantir la sécurité et l'efficacité, surtout dans le domaine biopharmaceutique. Une protéine recombinante avec une étiquette de fusion a des possibilités limitées d'obtenir une autorisation des agences médicales/ pharmaceutiques.

Sur la base de la plateforme R&D en biologiques microbiens, Yaohai Bio-Pharma propose des services personnalisés de préparation de protéines non étiquetées (Tag-free), dédiés à répondre à des objectifs spécifiques pour la recherche, le développement et la fabrication à usage clinique.

Mots-clés : production de protéines sans étiquette, purification de protéines non étiquetées, préparation de protéines basée sur l'absence d'étiquette, expression et purification de protéines sans étiquette, protéine cible hautement sans étiquette

Application : recherche en médecine humaine, développement de médicaments vétérinaires, développement de vaccins recombinants, production de biologiques moléculaires de grande taille recombinants

Notre Plateforme Microbienne R&D

Nous avons une grande expérience en ingénierie de souches microbiennes, fermentation et purification de produits.

Bactéries : Escherichia coli (E. coli)

Levures : Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Options personnalisées
Modalité Protéine recombinante
Matériaux de départ Séquences géniques, plasmide recombinant ou souches ingénierées
Livraisons Purification : >80 %, >85 %, >90 %. Quantité : 0,2~10 g (à déterminer en fonction du projet)
Système d'expression et formation

E. coli sécrétion périplosmique, expression soluble et en corps inclusifs ;

Expression intracellulaire ou par sécrétion levuriennes

Méthodes d'Analyse Ultraviolet (UV), test de bicinchoninate (BCA), Bradford ou Lowry pour la quantité
Électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS (SDS-PAGE) pour le test de purification
Optionnel : Western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), haute performance liquid chromatographie (HPLC)
Impuretés résiduelles Endotoxine (optionnel)
Détails du service

Services

Détails du service

Délai minimal (jour ouvrable)

Synthèse de gènes

Optimisation des codons pour un hôte d'expression spécifique

7~10 jours

Synthèse de gènes

Construction du plasmide/vecteur

Clonage dans le plasmide/vecteur

2 jours

Transformation du plasmide

Vérification par réaction en chaîne par polymérase (PCR), digestion par enzyme de restriction, séquençage génique

3 jours

Expression de la protéine en E. coli

Transformation de plasmide,

2 jours

Cultivation en flacon à secouement

3 jours

fermentation à l'échelle de 7L, optimisation

4 jours/lot

Purification de protéine sans tag, optimisation

5~10 jours/lot

Test par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de sulfate de dodécyle de sodium (SDS-PAGE)

Expression de la protéine dans la levure

Préparation de cellules compétentes de levure

4 jours

Linéarisation du plasmide et électro-transformation

fermentation à l'échelle de 7L, optimisation

5 jours

Purification de protéine sans tag, optimisation

7 jours/lot

Purification de protéines sans tag

5~10 jours/lot

QC par SDS-PAGE

Services supplémentaires (Optionnels)
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