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Plasmidentwicklung

Plasmidentwicklung

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Plasmidentwicklung

Plasmid-DNA, wie in vitro Transkriptionsvorlage (IVT) ist ein wichtiger Rohstoff für die mRNA-Herstellung. Hohe Ausbeute, hohe Reinheit und hohe Rückgewinnung von Plasmid-DNA sind die wichtigsten Ziel während der Plasmidprozessentwicklung.

Yaohai Bio-Pharma bietet eine Komplettlösung für die Plasmidentwicklung, einschließlich Upstream- (Fermentation), Downstream- (Reinigung) Prozessentwicklung, Prozesscharakterisierung und Prozessvalidierung. Wir verfügen über umfangreiche Erfahrung bei der Verbesserung der Plasmidausbeute und der Isolierung von Plasmiden aus komplexen Matrizen durch die Entwicklung und Optimierung von Fermentations-, Reinigungs- und Verunreinigungenentfernungsprozessen. 

Service Details

Der grundlegende Bioprozess zur Plasmidherstellung umfasst: Escherichia coli (E. coli) Fermentation, Zellernte und alkalische Lyse, Klärung, Konzentration, dreistufiger Chromatographieprozess (Erfassung, Zwischenreinigung und Politur) und Konzentration.

Service Details Einheitsbetrieb Parameter
E. coli Fermentation
Kolben schütteln Medienzusammensetzungen, Antibiotikum, Inokulumvolumen, Wachstumstemperatur usw.

Fermenter (7 l)

Antibiotikum, Inokulumvolumen, Wachstumstemperatur, pH-Wert, gelöster Sauerstoff (DO), Fütterungsmodus (z. B. Fed-Batch), Fütterungsmedium, Fermentationszeit usw.

Zellernte Mikrofiltration Standard E. coli Ernteprozess
Zelllyse Zellsuspendierung, alkalische Lyse, Neutralisation Alkaliverhältnis, Lysezeit
Klärung Filtration Grobfiltration, 20 µm und ein 5 µm Filterzug (bevorzugt)
Konzentration Ultrafiltration, Tangentialflussfiltration Porengröße (oder NMWC), Transmembrandruck (TMP), Fluss, Verhältnis Filtratvolumen zu Membranfläche  
Dreistufige Chromatographie Größenausschlusschromatographie (SEC) oder Gelfiltrationschromatographie (GFC)  Säulenlänge und -durchmesser, Pufferzusammensetzung, Injektionsvolumen, Zusammensetzung der mobilen Phase (Adsorption und Desorption), pH-Wert, Flussrate, Äquilibrierung, Bindung, Waschen und Elutionsbedingungen.
Affinitätschromatographie (AF)
Anionenaustauschchromatographie (AEX)
Konzentration Ultrafiltration, Tangentialflussfiltration Porengröße (oder NMWC), Transmembrandruck (TMP), Fluss, Verhältnis Filtratvolumen zu Membranfläche 
Weitere Prozesslösungen für die Aufreinigung biologischer Präparate
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