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Stammeszüchtung

Stammeszüchtung

Die Bedeutung der Stammeszüchtung

Die Stammeszüchtung hat zum Ziel, dem Ausdruckshost die gewünschten Merkmale zu verleihen, was für die CMC-Entwicklung von Biologika notwendig ist und die Qualität sowie die Konsistenz des Produkts und des Produktionsprozesses bestimmt.

Schlüsselwörter: gentechnische Modifizierung und Selektion von Stämmen, Proteinausdrucksstammkonstruktion, mikrobielle Zelleningenieurtechnik, Bakterienstammeszüchtung, Hefestammeszüchtung, Konstruktion prokaryotischer Mikroorganismen, Ingenieurtechnik eukaryotischer Mikroorganismen, modifizierte Stämme

Anwendung: Humanmedizin, Tiermedizin, Impfstoffe, Synthetische Biologie, rekombinante Makromolekülbiotherapeutika, biologische Reagenzien

Stammeszüchtungsdienstleistungen von Yaohai Bio-Pharma

Durch über 10 Jahre Erfahrung im Bereich CDMO in mikrobiellen Biologika haben wir umfangreiche Erfahrungen in der Konstruktion und Auswahl verschiedener Plasmidvektoren und mikrobieller Wirte (Bakterien, Hefen) gesammelt. Wir können das beste Expressionssystem für Ihre einzigartigen Biologika finden.

Wir haben verschiedene mikrobielle Wirte mit klaren Quellen und standardisierten CoA gesammelt, darunter

Bakterien: Escherichia coli (E. coli)

Hefe: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Service Details

Dienstleistungen

Service Details

Mindestzeitrahmen/Tag

Liefergegenstände

Stammeszüchtung

Gen-Knockout oder Gen-Deletion

TBD

Stamm-Engineering-Bericht

Gen-Einbau, oder Gen-Insertion

Stammbau ( E. coli )

Plasmidtransformation (mehrere Wirte)

5

COA der kommerziellen Wirte,

Stammbau-Bericht

PCR-Verifikation

Stammreinigung

Stammkonservierung

Stammkonstruktion (Hefezelle)

Herstellung von transformierfähigen Hefezellen

10

Plasmidlinearisierung

Elektrotransformation

Widerstand/Nährstoffmangel-Screening

Stammreinigung

Stammkonservierung

Screening für geeignete Wirtsorganismen

Plasmid- oder Genom-DNA-Extraktion

15-20

Wirts screening-Prozess,

Testbericht der genetisch veränderten Stämme

PCR-Verifikation, Restriktionsenzym-Verdaulichkeit

Sequenzierung von Zielgenen

Screening von Wirtsorganismen mit hoher Expression

Screening von Wirtsorganismen mit genetischer Stabilität

Stammkonservierung

Fallstudie

Gekoppeltes Hansenula polymorpha verbesserte die Ausbeute von HPV L1 VLP.  

Wir haben Hefezellen etabliert Hansenula polymorpha (H. polymorpha) ingenieur- und Screening-Plattform für den Ausdruck rekombinanter Proteine/Peptide. Zunächst erzeugten wir H. polymorpha proteasen-defiziente Streifen durch gezieltes Genschärfen. Zweitens wurde ein Vektor, der das HPV L1 Gen trug, in die transformierten H. polymorpha zelle. Schließlich wählen wir die beste Klon aus Hunderten von Optionen aus, mit genetischer Stabilität und hochproduzierenden Eigenschaften.

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Unsere Service-Stärken

Wir haben Fachkenntnisse in verschiedenen mikrobiellen Wirtsorganismen, z. B., Escherichia coli (E. coli)  DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink Stamm 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) und Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .

Wir haben Erfahrung mit E. coli periplasmasekretion, löslicher Expression und Inklusionskörpern sowie der intrazellulären oder Sekretionsexpression bei Hefen.

Wir verwenden keine Antibiotika oder setzen sie unter regulatorischer Aufsicht ein.

Wir etablieren eine Hochdurchsatz-Screening-Plattform, um hochproduzierende und stabile Stämme aus über hundert Kandidatenstämmen zu screenen.

Wir stellen sicher, dass der Prozess der Stammoptimierung und -auswahl nachvollziehbar ist und den Anforderungen der Good Data and Record Management entspricht.

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