Yaohai Bio-Pharma bietet N-Terminus-Sequenzierung und Datenanalyse-Dienstleistungen auf der Basis von Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS) oder dem Edman-Abbauverfahren an, mit denen Sie die Aminosäuren an den jeweiligen Enden des Proteins bestimmen können. N-Terminus-Modifikationen können ebenfalls mittels LC-MS analysiert werden.
Wir waren in der Charakterisierung der Proteinstruktur verschiedener großer Moleküle involviert, darunter Rekombinante Subeinheitsimpfstoffe, Nanobody/VHHs/Einzeldomänen-Antikörper (sdAbs), Antikörperfragmente, Hormone/Peptide, Interleukine, Wachstumsfaktoren (GF), Enzyme, Kollagene usw.
Regulatorische Anforderungen für N-Terminal-Sequenzierung
Gemäß den ICH Q6B-Leitlinien ist es notwendig, die Sequenz Ihres Proteins zu bestätigen und die Termini auf eventuell vorhandene Variationen hin zu untersuchen.
Methoden der N-Terminal-Sequenzierung
| Analyse |
Methode |
| N-Terminus-Sequenzierung |
Edman-Abbau, Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS) |
Verfahren
LC-MS
1. Fluoreszenzmarkierung des N-Terminus von Proteinen
2. Mehrfache Verdauungen
3. LC-MS/Massenspektrometrie (MS)-Analyse
Edman-Degradation
1. Sodium-Dodecyl-Sulfat-(SDS)-Gel-Elektrophorese Ihres Zielproteins
2. Übertrag des Gels auf Polyvinylidendifluorid-(PVDF)-Membranen und Färbung
3. Identifizieren und Ausschneiden der Zielproteinbande
4. Edman-Sequenzierung des N-Terminus
5. Datenanalyse
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